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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
170
- 英文名:
pCDNA3-14×MS2
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
少量干粉质粒/大提液体质粒
| 规格: | 少量干粉质粒 | 产品价格: | ¥580.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 大提液体质粒 | 产品价格: | ¥780.0 |
别称:
基因长:
质粒宿主:哺乳细胞
质粒用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:
原核抗性:Amp
筛选标记:Neo/G418
荧光标记:
启动子:CMV
复制子:pUC
感受态:DH5a
温度:37度
正向引物:CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
反向引物:BGH:TAGAAGGCACAGTCGAGG
注意事项:本产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药。
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文献和实验细胞COS.7。具体操作参照产品说明书。48 h后检测目的基因表达或以1:20传代后加入G418(400 g/mL)筛选,每2~3天换液1次。10~14 d后抗性克隆形成,分离并扩增各单克隆细胞。分别在转染后14、28、60 d检测目的基因表达。 EGFP基因表达检测 1.荧光显微镜观察EGFP基因表达:通过荧光显微镜观察荧光细胞数及荧光强度,并摄片。 2.流式细胞仪检测EGFP基因表达:pcDNA3-EGFP.EBVR和pcDNA3.EGFP.EBNA1.MAR转染细胞48 h
3复孔,设正常对照3复孔。以10-14天细胞全部死亡的浓度为筛选浓度,结果为200mg/L。2、在转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到60%-80%覆盖。一般要求,6孔培养皿(35mm),每孔1-2ml培养基3×105细胞。依据不同大小培养板调整每平方厘米的细胞数量。典型贴壁细胞平板密度培养板大小 生长面积(cm2)大约细胞数 培养基容积(ml)组织培养皿(φ60mm)28 6.6×105 5-66孔培养板(φ35mm)9.5 3×105
、400mg/L、500mg/L、600mg/L加入,各浓度3复孔,设正常对照3复孔。以10-14天细胞全部死亡的浓度为筛选浓度,结果为200mg/L。 2、在转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到60%-80%覆盖。一般要求,6孔培养皿(35mm),每孔1-2ml培养基3×105细胞。依据不同大小培养板调整每平方厘米的细胞数量。 典型贴壁细胞平板密度 培养板大小 生长面积(cm2)大约细胞数 培养基容积
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