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DNA pull-down Kit(植物)

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  • ¥699
  • 武汉金开瑞生物工程有限公司
  • JKR23006P
  • 中国
  • 2025年07月29日
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    • 供应商

      广州市左克生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      6T

    实验原理

    DNA pull down 技术是体外研究DNA与蛋白质互作的有力工具。该技术针对目标区域设计特异性DNA探针并经过脱硫生物素标记,标记后探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合,再与总蛋白提取物进行孵育,有互作的蛋白质可以和DNA探针特异性结合,形成磁珠-DNA探针-蛋白复合物,洗涤去除非特异性结合的蛋白质,再经过洗脱得到目的DNA探针-蛋白质复合物,最后通过Western Blot或质谱(MS)鉴定蛋白质类型。其原理图如1.1:

    产品细节图片1

    产品优势

    • 高灵敏度与特异性:

    • 采用高亲和力固相载体-链霉亲和素磁珠,优化实验体系,显著降低非特异性结合,适配低丰度样本。

    • 多维度下游分析兼容性:

    • 洗脱蛋白可直接用于质谱(MS)、Western Blot(WB)或银染,满足定性/定量分析需求。

    应用范围

    • 研究转录因子(TFs)与DNA的相互作用,定位调控元件(如启动子、增强子)的结合蛋白。

    • 解析表观遗传调控(如DNA甲基化、组蛋白修饰)对蛋白-DNA结合的影响。

    实验流程

    产品细节图片2

    产品细节图片3

    试剂盒组分

    产品细节图片4

    常见问题与解答

    Q:通过pull-down后银染验证发现,没有想要的目的条带?

    1)有可能是样品被蛋白酶降解,对应的策略是需要添加蛋白酶抑制剂,所有操作保持 4℃以下冰上操作并防止冻融;

    2)有可能是加入生物素标记DNA量不足,可以增加生物素标记DNA量;

    3)裂解液盐碱度太高,需用低盐碱度的裂解液;

    4)加入细胞裂解液不够,可以增加细胞裂解量。

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