细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒 JK-362

产品简介

细胞衰老时，SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平会上调，此时本试剂盒可以对衰老的细胞或组织进行染色检测。

正常细胞经过有限次数的分裂后停止分裂，出现不可逆的生长停滞，此时细胞仍然是存活的，但是细胞形态和生理代谢活性发生明显变化，通常表现为细胞体积变大，与衰老相关的β-半乳糖苷酶为活化状态。β-半乳糖苷酶是细胞溶酶体内的水解酶，通常在pH 4.0时表现活性，但在衰老细胞内该酶在pH 6.0条件下表现活性。本试剂盒即是基于此现象及原理，以X-Gal为底物，衰老细胞特异性β-半乳糖苷酶催化该底物生成蓝色产物，表现为细胞胞质有蓝色沉积物，在光学显微镜下即可很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。

本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测，也可以用于组织切片的衰老检测。本试剂盒仅染色衰老细胞，对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。

使用方法

见说明书

保存条件

-20℃避光保存一年。

注意事项

1、X-gal低温保存可能会结冻，室温或37℃水浴2-5min溶解即可，注意避光保存。固定液对人体有毒，请小心操作。

2、染色液B低温保存可能会结晶，55℃水浴5-10min溶解即可，染色液B对人体有毒，请小心操作。

3、染色工作液现用现配。如不能一次用完，请分装保存。

4、细胞衰老β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件，不能在二氧化碳培养箱中进行染色反应。用于细胞培养的二氧化碳培养箱中较高浓度的二氧化碳会影响染色工作液的pH值，而导致染色失败。

5、本试剂盒不适用于石蜡切片组织样本，在石蜡包埋的过程中，温度、固定液等因素可能会导致β-半乳糖苷酶失活，从而造成染色失败；如果一定要用于石蜡切片的检测，建议自行对实验条件进行一定的优化。

6、使用96孔板等多孔板进行检测时，如果孵育过夜容易产生所谓的“边缘效应”，即多孔板四周的孔由于和外界最直接接触，易受外界环境影响，其中最明显的是四周细胞培养孔的蒸发效应。边缘效应会导致细胞生长不均匀、细胞分布不均一、培养液体积不一致、培养液中相关成分的浓度、pH值不一致。建议采取以下方法避免96孔板等多孔板的边缘效应：避免孵育过长时间，以避免蒸发等带来的边缘效应；弃用边缘孔并在弃用的边缘孔中加入等量的水、PBS或其他适当溶液；在多孔板非孔的凹陷处加入适量的水或其他适当溶液；将整块板放在湿盒中；使用防挥发盖；在实验设计时，实验样品最好进行随机分配，不要将某一组样品固定放在某个位置而引入可能的系统性误差。

7、加入染色工作液后，由于溶液蒸发或其它未知原因等因素，可能会有结晶形成而影响观察和拍摄，此时建议吸除染色工作液，加入适量70%乙醇进行洗涤，70%乙醇可在短时间内溶解结晶，待结晶溶解消失后再更换成PBS或生理盐水。70%乙醇的洗涤对染色效果没有任何影响。

8、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

9、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。