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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
样
组织类型
公司介绍:
佳维斯(武汉)生物医药有限公司位于高新产业和高智力集群的聚集地——中国·光谷,武汉精准医疗产业基地,公司创始团队来源于武汉光电国家研究中心、同济医学院及中国科学院,具有20年以上组织透明及三维成像技术研发经验。是目前同时掌握离体组织器官透明、与活体组织器官透明及活体类器官芯片透明技术的团队,能够提供和开展离体透明试剂盒及离体三维透明成像技术服务、活体透明试剂盒及活体透明深层组织区域在体检测技术服务、类器官透明及类器官活体三维在线检测的高新技术企业。 佳维斯生物专注组织透明化技术研究20余年,可一站式解决整体组织染色、透明化、成像及三维重构、以及各类高难度分析! 公司建有完善的在体电生理、膜片钳、光/化学遗传、400多平米各类动物影像平台,可满足包括近百种动物模型构建、196多项行为学测试、在体电生理、膜片钳、光/化学遗传、病毒注射和激光共聚焦、双光子等成像需求。
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文献和实验在利用人类和实验动物等个体生物评估药物时,测量值会受年龄和生长环境等各种因素的影响,因而很难对来自多个样本的数据进行统计分析。 类器官和细胞球等三维细胞培养模型,可近似模拟器官或组织的体内结构和功能,并可在体外大规模培养。因此,使用这些模型的统计分析结果是高度可再现的。由于三维细胞培养模型能够再现肿瘤中的细胞异质性,所以三维细胞成像分析有助于药物的评估。 利用三维细胞成像分析评估药效的工作流程可分为以下三个阶段(图1): 制备、培养和处理三维细胞培养模型 采集细胞图像 进行统计
光二抗,每孔300μL二抗工作液。 ②4℃避光孵育过夜。 ③OWB洗涤2次,每次5min。 3.细胞核DAPI染色(≥1h) ①DAPI储备液1:1000用OWB稀释,每孔300μL。 ②室温避光孵育至少1h。 ③OWB洗涤2次,蒸馏水洗涤1次,彻底吸干孔内水分。 阶段6:组织透明化与共聚焦成像 1.透明处理:每孔滴加3滴RapiClear1.49透明化试剂,室温避光静置2h(或过夜)。 关键质控:不透明化仅能观察类器官表层细胞,无法完整三维成像 2.共聚焦显微镜采集:蔡司LSM800倒置共聚
抗孵育时间。如果大型类器官始终无法获得稳定中心信号,可改用冰冻或石蜡切片。 2. 染色不均,局部没有信号 重点检查样本是否在回收过程中发生机械损伤,以及孵育时是否大量堆积在一起。 全程减少吹打,孵育时低速轻摇,并保证抗体液能够充分接触类器官表面。 3. 整体背景偏高 常见原因包括封闭不足、抗体浓度过高、洗涤不足以及残留基质胶过多。 可依次延长封闭和洗涤时间,再适当降低抗体浓度。 图3|二抗阴性对照/自发荧光示例 六、三维成像:整装染色更适合Z-stack 普通荧光显微镜适合快速判断
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