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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
盒
佳维斯FDISCO离体组织透明化试剂盒,可快速实现大鼠、小鼠 完整组织的透明化,如脑,心,肝,脾,肾,肠,脊髓等组织透明化,FDISCO组织透明化试剂具有透明速度快、效果好、荧光兼容性强等优点。
FDISCO方法结合光片照明成像可以实现小鼠全脑、肌肉、肾脏等多种完整组织器官的神经与血管成像。由于其优秀的透明及荧光保持能力,FDISCO方法在大体积生物组织透明成像上具有显著的优势,并且在透明生物组织的长期重复成像和弱荧光信号成像上具有极大的应用价值。
佳维斯研发的FDISCO离体透明试剂盒具有透明速度快、透明效果好、荧光保持性强等优点。
规 格 说 明
| 序号 | 规格 | 内包装 | 货号 | 价格 |
|
1 |
20mL |
6瓶/组/盒 |
JA11011 | 3000元 |
|
2 |
50mL |
6瓶/组/盒 |
JA11012 | 5500元 |
| 3 |
100mL |
6瓶/组/盒 |
JA11013 | 8800元 |
使用说明
FDISCO离体组织透明试剂盒使用说明
1、成分外观:本品分为6种试剂,试剂A-F皆为无色透明液体。
2、保存方式:常温下避光保存,保质期6个月,开盖后请尽快使用。
操作说明:
(1). 样本浸泡时间:
按试剂字母顺序依次浸泡样本,试剂A-E中浸泡时间依据样本尺寸而定。
参考标准:
小鼠全脑:每一种试剂浸泡时间为12小时;
小鼠脊髓:每一种试剂浸泡时间为1小时;
对于较大尺寸的样本,如小鼠全脑,需要额外增加一次试剂E的处理步骤。
样本在试剂F中浸泡时间以样本透明情况为准,泡至透明即可。
(2). 以上每个步骤均须恒温避光震荡,温度为4-8℃;
(3). 样本放在5-15ml棕色小瓶里,每步试剂大概需要2倍于没过样本的量,如没过样本需要5ml,则最好 加入10ml透明试剂(每个样本平均单次用量4-10ml,具体用量视样本大小而定);
(4). 样本经4%PFA固定后需用PBS彻底洗净后(>12h)再进行透明;
(5). 样本成像时需浸没在成像液中。
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文献和实验之一,其制备方案需根据脑区、发育阶段和疾病模型进行精细化调整和优化。如对于胚胎或者新生脑组织,其髓鞘化低、ECM 松散以透明质酸为主,需要注重解离过程的温和处理。而成年神经组织因髓鞘致密,ECM 交联显著。必须采用更高强度、多酶联合且配合机械剪切和密度梯度去髓鞘的策略,以兼顾解离效率与细胞存活。 针对不同肿瘤类型,单细胞悬液制备需「因瘤施策」:血液瘤离心即可。实体瘤则先机械剪切,再以胶原酶、透明质酸酶和 DNA 酶破除致密细胞外基质,其中富含纤维和 ECM 胶原的胰腺癌或乳腺癌需更长酶解。对于常规
取材和固定 组织标本及时的取材和固定是做好免疫组化染色的关键第一步,是有效防止组织自溶坏死,抗原 丢失的开始,离体组织应尽快的进行取材,最好2h内,取材时所用的刀应锐利,要一刀下去切开组织,不可反复切拉组织,造成组织的挤压,组织块大小要适中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切记取材时组织块宁可面积大,千万不能厚的原则,(也就是说组织块的面积可以大到3cm×5cm,但组织块的厚度千万不能超过0.2cm,否则将不利于组织的均匀固定)。固定液快速渗透到组织内部使组织蛋白能在一定
内的,而酶只有在甘油浓度 具体操作如下:在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA(1 μg/μl)20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶(10 U/μl)5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积,或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质,或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
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