终止液（ELISA 专用）

外泌体专用培养基 VS 去外泌体血清，谁赢了？

体，后续培养后收集的细胞上清中的外泌体不确定是从细胞分泌的还是血清中来的，影响结果的准确性。   2. 营养：细胞培养是需要一定的营养的，那么如果不加血清，单独只用基础培养基，就会导致细胞处于饥饿状态，严重影响细胞生长，甚至出现吞噬外泌体的现象，影响实验结果。   3. 杂蛋白：去外泌体胎牛血清可以很好地解决 1、2 中涉及的问题，但还会存在杂蛋白影响蛋白定量结果，导致数据偏高，影响后续实验的准确性。如果使用外泌体专用无血清培养基（专门针对外泌体获取的培养基，化学成分明确，类似于完全培养基的一种

ELISA 提示

ELISA 实验失败可能由多种因素造成。在实验前阅读并充分了解产品说明书，可以一定程度上避免出现意想不到的结果。参考以下提示来避免实验出现问题。 1. 检查试剂盒的保质期，保证所有试剂按说明书上的建议正确保存； 2. 检查试剂溶液是否存在不稳定或降解迹象，如沉淀或变色等； 3. 底物溶液应为无色； 4. 试剂制备和保存时应使用干净的一次性塑料吸量管、枪头和容器。每次加液（样品、标准品及其他试剂）时，及时更换枪头，避免交叉污染； 5. 确保孵育时间和温度与规定的高度一致； 6. 盒中试剂不能

ELISA 结果计算

作为 ELISA 的最后一步，检测结果的计算对整个实验十分重要。 以夹心法为例。 1. ELISA 的样本通常要设置 1~2 个复孔进行检测，分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。单个样本的检测值不应超出平均值的 20%。 2. 样本的 OD（吸光度）平均值要减去标准品浓度为 0 时的 OD 平均值。 3. 建立标准曲线 在对数坐标图上拟合四参数的逻辑函数曲线（X 轴上为标准品浓度，Y 轴为对应的 OD 值）。推荐使用 origin 软件。 详细步骤如下： 第一步: 输入 OD 值