通用型基因转染试剂

产品介绍    

本公司生产的通用型基因转染试剂是一款高性能、高品质的通用型基因转染试剂，既可用于传送质粒DNA，又具有较强的RNA转染能力。与其它转染试剂相比，具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。

应用范围   

该转染试剂可适用于各种较难转染细胞株的质粒DNA或siRNA的转染。适用于多种贴壁细胞，特别适用于各种较难转细胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等，均可得到较高的转染效率，且重复性好。

使用方法

质粒DNA的转染

以24孔板为例，请参考下表的转染规模调整，步骤如下:

1、细胞接种: 每孔接种0.5-1.0×105个细胞，细胞培养12-24小时，使转染时细胞密度达到60-70%融合度。

2、DNA/siRNA稀释: 将0.5µg质粒DNA或15pmol siRNA加入Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为10µL。

3、转染试剂稀释: 取1μL的转染试剂加入到9μL的Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为10µL。

4、复合物制备：将上述质粒DNA或siRNA稀释液和转染试剂稀释液混合，轻轻吹打均匀后，室温静置10分钟。

5、将上述20µL复合物加入到24孔板中，轻轻吹打混匀，继续培养18-48小时后检测转染效率，无需更换培养基。

siRNA的转染

转染步骤与DNA相同，请参考下表的转染规模进行调整，所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。                  

质粒DNA和siRNA的转染优化 

可通过改变细胞密度、DNA或siRNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上，转染试剂 (µL):DNA (µg)可以在1:1至5:1之间调整，转染试剂 (µL):siRNA ((pmol))可以在0.02:1至0.15:1之间调整     

 

                 不同培养板所需转染试剂和DNA的用量

培养板	单孔面积	接种培养基	Opti-MEM稀释后终体积	DNA转染		siRNA转染
				试剂用量	DNA	试剂用量	siRNA
96孔板	0.3cm2	200µL	10µL	0.4µL	0.2µg	0.5µL	7.5pmol
24孔板	2cm2	500µL	20µL	1µL	0.5µg	1µL	15pmol
12孔板	4cm2	1mL	40µL	2µL	1µg	2µL	30pmol
6孔板	10cm2	2mL	100µL	4µL	2µg	4µL	60pmol
60mm培养皿	20cm2	5mL	200µL	8µL	4µg	8µL	120pmol
100mm培养皿	60cm2	15mL	600µL	24µL	12µg	24µL	360pmol

运输保存 

常温运输，2-8℃可保存一年。

注意事项 

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。