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大量
- 供应商:
上海科梦达生物
- 英文名:
q272974257
- 规格:
1ml*10支
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文献和实验一、材料及试剂 1、猪瘟单抗纯化抗原 2、兔抗猪IgG酶标抗体 3、猪瘟阳性血清 4、猪瘟阴性血清 1~4均由指定的生物制品所购买。 5、ELISA反应板 6、包被液 碳酸钠 1.50g 碳酸氢钠 2.93g H2O加至 1 000ml pH值9.6 7、PBS液 氯化钠 8.90g 磷酸二氢钾 0.20g 无水磷酸氢二钠 2.13g 加双馏水 1 000ml 8、PBS-吐温洗涤液 PBS液 1 000ml 犊牛血清 5ml 混合即可 9、底物
装柱、加样,以0.05mol/L pH7.4 PBS洗脱,收集洗脱液,如上法测定活性和蛋白含量。 3.亲和层析法 (1)猪IgG的制备:取正常猪血清,硫酸铵提取球蛋白,再过DEAE-纤维素-32柱,制得纯化的IgG,以0.1mol/L NaHCO3液平衡,配成4mg~5mg/ml溶液。 (2)偶联:将固体溴化氰1.2g溶于20ml蒸馏水中,倾入容积为15ml的Sepharose-4B中,搅拌,同时滴加2mol/L NaOH使pH维持在11.0,反应8min,用500ml预冷的0.1mol/L
间接法免疫荧光组织化学染色步骤 1.检测抗原法以单层细胞培养标本为例介绍此法的染色步骤: (1)取出细胞贴附生长的小盖片,用预热的PBS冲洗2次; (2)4%多聚甲醛(或冷丙酮)固定5~10分钟,晾干; (3)0.01MPBS(pH 7.4)漂洗3次,每次5分钟。 (4)0.3%Triton X-100孵育,室温20分钟,PBS漂洗2次(细胞膜抗原可省略此步骤); (5)非免疫血清(或15%小牛血清)孵育,室温10分钟; (6)滴加特异性一抗(如小鼠
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