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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
上海科梦达生物
- 英文名:
q272974257
- 规格:
1ml*10支
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文献和实验一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质;第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来,操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清(兔抗鸡血清)。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:60mmol/L,pH
我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
上,然后再分别洗脱下来获得纯品,或者把不需要的成分吸附于离子交换剂上,需要的成分直接流出,得到纯品。本实验采用DEAE-纤维素层析柱纯化血清IgG,利用pH6.7的缓冲液溶解样品IgG,此时IgG粗物中除IgG外,其他杂蛋白均带上不同数量的负电荷,可以和DEAE上的阴离子发生交换吸附于柱上。IgG因不解离带电,而不发生交换吸附,利用此特点,让溶解后的样品流过DEAE纤维素柱,即可直接收集到较纯的IgG。(二)试剂及器材 (1)DEAE-纤维素的活化:称取1g DEAE32或52,放入5ml量筒中,加蒸馏
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