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iTRAQ

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    iTRAQ:是一种相对和绝对定量的同位素标记技术,广泛应用于蛋白质组学研究中。iTRAQ技术通过标记蛋白质或肽段,实现蛋白质的定量分析,从而揭示蛋白质在生物过程中的动态变化。

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    iTRAQ工作原理

    iTRAQ技术的核心是利用同位素标记试剂,对蛋白质样本进行标记。这些标记试剂由两部分组成:平衡区和报告区。平衡区保证标记后的肽段具有相同的质量,而报告区在质谱分析时产生不同的碎片离子,用于定量分析。

    iTRAQ操作流程

    iTRAQ技术的操作流程主要包括样本处理、酶切、标记、混合、分离和质谱分析等步骤。其中,样本处理是实验的基础,包括蛋白质的提取、纯化和浓缩等;酶切是将蛋白质切割成肽段,为后续的标记提供便利;标记是将iTRAQ试剂与肽段结合,形成标记肽段;混合是将不同样本的标记肽段混合在一起,进行质谱分析;分离是通过液相色谱将混合肽段进行分离,以提高质谱分析的准确性;质谱分析是通过质谱仪对肽段进行分析,获取蛋白质的定量信息。

    相关实验
    • Phosphoproteomics Using iTRAQ

      is a subject of intense interest. We discuss three applications of isobaric tags for relative and absolute quantitation (iTRAQ) to the analysis of phosphopeptides from a variety of sample materials.

    • iTRAQ技术问题答疑

      1. itraq的原理是什么? Itraq的检测可以做这样的比喻,蛋白被打成肽段后,被平均的铺在了一个有384个孔的平板上,然后机器会从每个孔中选取浓度在前5名的蛋白进行鉴定和比对,所以,如果假设每个一个样本中有100个蛋白,他们的浓度均为1%,那么得到的结果就是蛋白的得分低,但是鉴定的蛋白数量会很多,可以达到90以上;如果一个样本中有100个蛋白,有3个蛋白的含量分别为30、20、10、其他的97钟蛋白为剩下的50%,那么这三种蛋白的得分高,但是鉴定出的蛋白数量会比较少,也许

    • Label-free/iTRAQ定量蛋白质组学技术

      共沉淀蛋白互作分析、MRM/PRM定量蛋白组学分析、SILAC/Dimethyl标记定量蛋白组分析、SWATH定量蛋白组学、TMT/iTRAQ/multinotch定量蛋白组学分析。下面介绍两种比较常见的定量蛋白质组学技术。 iTRAQ定量蛋白质组学分析 iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation) 技术是由美国应用生物系统公司ABI研发的一种多肽体外标记技术。该技术采用4种或8种同位素的标签,通过特异性标记多肽的氨基基团,而后进

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