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黄嘌呤氧化酶（XOD）试剂盒

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  • ￥360
  • wksubio
  • WS9310F
  • 国内
  • 2025年07月20日
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    • 英文名：

      Xanthine oxidase (XOD) Kit

    • CAS号：

      WS9310F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    黄嘌呤氧化酶（xanthione oxidase, XOD）试剂盒说明书
    （货号：WS9310F 分光法 48 样）
    一、产品简介：
    黄嘌呤氧化酶（XOD，EC 1.17.3.2）属需氧脱氢酶类，是活性氧主要来源之一，也是
    核苷酸代谢的关键酶之一。XOD 主要分布于哺乳动物的肝脏等组织中，当肝功能受损时，
    XOD 大量释放到血清中，对肝损害的诊断具有特异性的意义。
    黄嘌呤氧化酶（XOD）催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子自由基，接着与显色剂反
    应生成有色物质，通过检测有色物质的生成量多少即可计算得出 XOD 酶活性大小。
    二、试剂盒组分与配制:
    试剂名称
    规格
    保存条件
    备注
    提取液
    液体 60mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    粉体 mg×1 支
    -20℃保存
    用前甩几下使粉剂落入底部，再加
    1.6mL 蒸馏水溶解备用。
    试剂二
    液体 40mL×1 支
    4℃保存
    试剂三
    粉体 mg×5 支
    4℃保存
    临用前甩几下，使粉剂落到底部，
    每支加 0.1mL 试剂四振荡或超声
    溶解后，再加 3.9mL 蒸馏水混匀使
    用（务必加 0.1mL 试剂四溶解后
    再加水），一周内用完。
    试剂四
    液体×1 支
    4℃保存
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、可调式移液器、研钵、
    冰和蒸馏水。
    四、黄嘌呤氧化酶（XOD）的测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备
    ① 组织样本：
    取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，在 4ºC 或冰浴进行匀浆(或使用各类常见匀浆器)。
    4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
    ② 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。
    2、上机检测
    ① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 450nm，蒸馏水调零。
    ② 测定前将试剂一、二和三 25℃水浴 5min 以上。
    ③ 试剂三每次加样前务必混匀，保证试剂的均一性。
    ④ 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    样本
    60
    试剂一
    30
    试剂二
    320本试剂盒仅供科研使用
    2
    试剂三
    320
    37℃避光孵育，立即于 450nm 读取吸光值
    A1，30min 后读取 A2，ΔA=A2-A1。
    【注】：若ΔA 在零附近徘徊，可延长反应时间 T（如增至 60min）或加大样本量 V1（如增加至 100μL，
    则试剂二相应减少），则改变后的反应时间 T 和样本量 V1 需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1. 按样本鲜重计算：
    酶活定义：37℃下每克组织样本每分钟催化产生 1nmol 有色物质为一个酶活单位（U）。
    XOD 活性(U/g 鲜重)=(△A÷ε÷d×V2×109)÷(W×V1÷V)÷T=13.1×△A÷W
    2. 按样本蛋白浓度计算：
    酶活定义：37℃下每毫克蛋白样本每分钟催化产生1nmol有色物质为一个酶活单位（U）。
    XOD 活性(U/mg prot)=(△A÷ε÷d×V2×109)÷(V1×Cpr)=13.1×△A÷Cpr
    3. 按液体体积计算：
    酶活定义：37℃下每毫升样本每分钟催化产生 1nmol 有色物质为一个酶活单位（U）。
    XOD 活性(U/mL)=(△A÷ε÷d×V2×109)÷V1×D=13.1×△A
    V---提取液体积，1 mL；
    V1---加入反应体系中样本体积，0.06ml；
    d---光径，1cm；
    V2---反应体系总体积，730μL =7.3×10-4L；
    ε---甲臜物质的摩尔消光系数，3.1×104 L /mol/cm；
    T---反应时间，30min；
    W---样本质量，g；
    Cpr---样本蛋白质浓度，mg/mL ；建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。

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