酪氨酸解氨酶(TAL)试剂盒

酪氨酸解氨酶(TAL)试剂盒

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  • ¥520
  • wksubio
  • WS7310F
  • 国内
  • 2025年08月05日
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    • 英文名

      Tyrosine ammonia lyase (TAL) kit

    • CAS号

      WS7310F

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    酪氨酸解氨酶Tyrosine ammonia-lyaseTAL试剂盒说明书
    (货号:WS7310F 紫外分光法 48 样)
    一、产品简介:
    酪氨酸解氨酶(TALEC 4.3.1.23)是对香豆酸合成的另一种途径中的关键酶。在生物
    体内,对香豆酸的合成有两条途径。一是以苯丙氨酸为底物,经苯丙氨酸解氨酶催化生成肉
    桂酸, 再经细胞色素 P450 酶系催化生成对香豆酸。而部分苯丙氨酸解氨酶被发现可以直
    接催化酪氨酸,生成对香豆酸,成为对香豆酸合成的另一途经,
    本试剂盒根据酪氨酸解氨酶(TAL)催化 L-酪氨酸生成对香豆酸,该物质在 310nm 处有
    最大吸收值,通过测定吸光值升高速率计算 TAL 活性。
    二、试剂盒组分与配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    提取液
    液体 60mL×1
    4℃保存
    试剂一
    液体 80mL×1
    4℃保存
    试剂二
    液体 13mL×1
    4℃保存
    三、需自备的仪器和用品:
    紫外分光光度计、1ml 石英比色皿(光径 1cm)、水浴锅、离心机、可调式移液器、研钵、
    冰和蒸馏水。
    四、酪氨酸解氨酶(TAL)的测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备
    ① 组织样本:
    取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆。12000rpm ,4℃离心 10min,取上清,
    置冰上待测。
    【注】:若增加样本量,可按照组织质量(
    g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取
    ② 细菌/细胞样本:
    先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
    提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
    12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
    【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。
    2、上机检测
    ① 紫外分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 310nm,蒸馏水调零。
    ② 在 EP 管中或 1mL 石英比色皿中按顺序加入下列试剂:
    试剂名称(μL
    测定管
    对照管
    样本
    100
    100
    试剂一
    650
    900
    试剂二
    250
    混匀,37℃反应 60 min,立即于 310nm 处读取吸光值 A
    A=A 测定-A 对照(每个样本需做一个对照管)。
    【注】若A 在零附近徘徊,可增加样本加样量 V1(如增至 150μL,则试剂一相应减少)或延长反
    应时间 T(如增至 90min),则改变后的加样量 V1 或反应时间 T 需代入计算公式重新计算。本试剂盒仅供科研使用
    五、结果计算:
    1、按样本鲜重计算
    酶活定义:在 37℃下,每克组织在反应体系中每小时使 A310 吸光值变化 0.01 为一个酶活
    单位(U)
    TAL(△OD310/h/g 鲜重)=ΔA÷(W×V1÷V)÷0.01÷T =1000×ΔA÷W
    2、按蛋白浓度计算
    酶活定义:在 37℃下,每毫克组织蛋白在反应体系中每小时使 A310 吸光值变化 0.01 为一
    个酶活单位(U)
    TAL(△OD310/h/mg prot=ΔA÷V1×Cpr÷0.01÷T =1000×ΔA÷Cpr
    3、按细胞/细菌数量计算:
    酶活定义:在 37℃下,每 104个细胞/细菌在反应体系中每小时使 A310 吸光值变化 0.01
    一个酶活单位(U)。
    TAL(△OD310/h/104 cell)= ΔA÷(500×V1÷V) ÷0.01÷T=2×ΔA
    V---加入提取液体积,1 mL
    V1---加入样本体积,0.1mL
    T---反应时间,60 min=1h
    W---样本质量,g
    Cpr---样本蛋白质浓度,mg/mL;建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
    2

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