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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
U-2 OS; U-2OS; U-2-OS; U2-OS; U20-S; U20S; 2T |
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组织来源 |
骨 |
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疾病 |
骨肉瘤 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代,消化2-3分钟 |
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完全培养基配置 |
McCoy's 5A培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
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简介 |
该细胞系(原名2T)是由PontenJ和SakselaE在1964年从一名15岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤中分离建立的。与WI-38共培养或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的补体结合试验(CF法)未检测到病毒。该细胞表达胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ)受体和骨肉瘤衍生生长因子(ODGF)。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
~25-30h |
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基因表达 |
osteosacoma derived growth factor (ODGF), Blood Type A; Rh+; HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-) |
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抗原表达 |
Blood Type A; Rh+; HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-) |
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受体表达 |
insulin-like growth factor I (IGF-I);insulin-like growth factor II (IGF II) |
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STR |
Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:13;D16S539:11,12;D18S51:10.2,12,14;D19S433:15;D21S11:31;D2S1338:20,24;D3S1358:16,18.3;D5S818:11;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:20;TH01:6,9.3;TPOX:11,12;vWA:14,18; |
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培养条件 |
气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040 |
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保藏机构 |
ATCC; HTB-96 |
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产品使用 |
仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。












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