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人骨肉瘤细胞U-2OS(STR鉴定正确)

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  • 赛泓瑞生物
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  • SHC1013H
  • 2025年07月20日
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    • 供应商

      SHCC

    • 运输方式

      干冰/常温

    • 年限

      10年

    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 规格

      1*10^6cell/T25

    种属

    别称

    U-2 OS; U-2OS; U-2-OS; U2-OS; U20-S; U20S; 2T

    组织来源

    疾病

    骨肉瘤

    传代比例/细胞消化

    1:2传代,消化2-3分钟

    完全培养基配置

    McCoy's 5A培养基;10%胎牛血清;1%双抗

    简介

    该细胞系(原名2T)是由PontenJ和SakselaE在1964年从一名15岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤中分离建立的。与WI-38共培养或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的补体结合试验(CF法)未检测到病毒。该细胞表达胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ)受体和骨肉瘤衍生生长因子(ODGF)。

    形态

    上皮细胞样

    生长特征

    贴壁生长

    倍增时间

    ~25-30h

    基因表达

    osteosacoma derived growth factor (ODGF), Blood Type A; Rh+; HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)

    抗原表达

    Blood Type A; Rh+; HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)

    受体表达

    insulin-like growth factor I (IGF-I);insulin-like growth factor II (IGF II)

    STR

    Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:13;D16S539:11,12;D18S51:10.2,12,14;D19S433:15;D21S11:31;D2S1338:20,24;D3S1358:16,18.3;D5S818:11;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:20;TH01:6,9.3;TPOX:11,12;vWA:14,18;

    培养条件

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    冻存条件

    冻存液:90%FBS,DMSO 10%,

    或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040

    保藏机构

    ATCC; HTB-96

    产品使用

    仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。


    细胞培养操作
    1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
    3. 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
    a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
    b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
    c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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