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- Cayman
- 31417-1 mg
- 2025年07月20日
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文献和实验一、材料与试剂 1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB（50 mL）/400转化DMSO4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。2. 加过夜培养的菌到500 ml 的SOB或2×YT，其装在4L瓶中以最大限度的透气。加入36 ml 5 M 的NaCl，在30℃下培养。3. 大约3 h，OD600达到0.5。4. 离心细胞。取沉淀，吸取
一、目的与原理当细菌处于容易吸收外源DNA的状态时，即为感受态，而用理化手段使细菌处于感受态的操作为致敏过程。感受态细胞制备是重组基因能否实现转化的一个重要的技术环节。本试验是通过钙离子来诱导使之成为感受态细胞。二、材料和方法1． 材料：大肠杆菌2． 仪器：离心机，恒温摇床，恒温水浴，超净工作台，冰柜3． 试剂LB培养基，0.1M MgCl2，3mM氯化六氮合高钴TFB：10Mm MES（pH6.3）45Mm MnCl210Mm CaCl210Mm KCl三、操作步骤大肠杆菌在LB培养基平板
3. 试剂 LB培养基，0.1M MgCl2，3mM氯化六氮合高钴 TFB：10Mm MES(pH6.3) 45Mm MnCl2 10Mm CaCl2 10Mm KCl 三、操作步骤 大肠杆菌在LB培养基平板上划线培养12-16小时，挑取单菌落于LB培养基摇瓶培养大肠杆菌到对数期。取1ml培养物7000rpm，离心3min，收集菌体。再重复一次。冰浴放置。用预冷的氯化镁悬浮菌体7000rpm离心3min。收集
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