昆虫脂褐素(Lipo)ELISA科研试剂盒

【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统，影响蛋白表达的因素？

-6及阳性对照Bacmid/CAT，已构建成功。 2.  昆虫细胞Sf9、High Five及其相关培养基、转染试剂均购自Invitrogen公司。抗His单克隆抗体购自Oncogene公司，CAT-ELISA试剂盒购自 Roche。 实验步骤： 一、  昆虫细胞转染： 1．  Sf9细胞计数，取6孔板中的两孔，每孔加入9×10 5个细胞(其中一孔设为正常对照)，并以全培培养至少1小时，使细胞贴壁。 2．  准备重组质粒和细胞转染试剂的混合物： a.  溶解1μg纯化重组杆状

RNAi及siRNA转染相关实验攻略

载体2个shRNA，涉及到2个shRNA的表达和加工的问题，关键还是2个shRNA都需要顺利表达的问题，这就和你的载体，以及2个shRNA在载体的排列有关系。至于蛋白之间的相互影响，估计你应该考虑到了。   23、问：我转的是昆虫细胞，dsRNA的浓度为2.3ug/ul，如果加到六孔板时，需要加入多少微升？用的转染试剂是lipo2000。还有培养基用FBS的培养基，里面是否还有RNase也不敢确定，有必要用专门的培养基吗？ 答：具体的实验参数需要通过梯度实验确定。培养基的问题

关于细胞凋亡的讨论

膜的改变是这些特征中较早出现的一种。在凋亡细胞中，细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的外侧。Annexin-V是一种35－36 KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白，它对PS具有较高的亲和力。细胞凋亡时，可以和外翻的PS结合，从而可以检测凋亡的细胞。发生坏死的细胞其细胞膜上的PS也外翻，因而也会阳性。因此，常用的凋亡试剂盒除了采用Annexin-V标记之外，还会加一种DNA染料，常用的有PI和7－AAD，由于坏死的细胞膜通透性增高，染料可以进入细胞内和DNA结合，从而可以发荧光，区分出坏死