昆虫胰凝乳蛋白酶(Chymotrypsin)ELISA科研试

胰凝乳蛋白酶chymotrypsin

　　胰凝乳蛋白酶 chymotrypsin 一种蛋白酶，脊椎动物的消化酶。 EC 3.421.1。在胰脏中以酶前体物质胰凝乳蛋白酶原的形态生物合成，随胰液分泌出去。在小肠受到胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的一定的分解，转变成活性的胰凝乳蛋白酶。属于肽链内切酶，主要切断多肽链中的芳香族氨基酸残基的羧基一侧。对其氨基酸序列、高级结构，反应机制的研究还在进展中。牛的α -胰凝乳蛋白酶的氨基酸残基数 245个，分子量约 2.5万，第 57位组氨酸、 102位天冬氨酸、 195位丝氨酸等三个残基

天然蛋白纯化思路解析

没有太多要求，任何层析都可以无缝衔接。   我们来看个具体晋级路线帮助增强自信。从微生物提取胰凝乳蛋白酶α-chymotrypsin。 α-Chymotrypsin 属于丝氨酸蛋白酶的一种，在酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸的羧基处水解肽键。 表1. α-Chymotrypsin参数和对纯化设计影响表   样品前处理使用超声方法进行菌体破碎，然后提取胞内总蛋白至合适 pH 值的缓冲液中，蛋白酶较不稳定，应同时考虑纯度和蛋白回收率之间的平衡关系。 图3. 样品处理流程图     纯化策略设计为： pl

【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统，影响蛋白表达的因素？

-6及阳性对照Bacmid/CAT，已构建成功。 2.  昆虫细胞Sf9、High Five及其相关培养基、转染试剂均购自Invitrogen公司。抗His单克隆抗体购自Oncogene公司，CAT-ELISA试剂盒购自 Roche。 实验步骤： 一、  昆虫细胞转染： 1．  Sf9细胞计数，取6孔板中的两孔，每孔加入9×10 5个细胞(其中一孔设为正常对照)，并以全培培养至少1小时，使细胞贴壁。 2．  准备重组质粒和细胞转染试剂的混合物： a.  溶解1μg纯化重组杆状