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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验【求助】烟叶表面微生物总DNA我死活提不出来...暴走...
sophiebaby 样品是经过陈化的烟叶,比较干燥的,其表面有一定量的微生物,我需要提取这些微生物的总DNA 经过buffer浸泡和摇1h左右,得到烟叶浸出液,然后双层纱布过滤,离心收集沉淀,进行常规的细菌基因组提取步骤 就是裂解、抽提什么的,大致上按照文献所述。但是我死活提取不出来,nanodrop只有很低的浓度,跑电泳没有完整的条带。 我的下一步是要扩增16s的,有一两次有基因组条带,但是PCR也没有
hust_ggjj 第一次1%的胶,跑的图 感觉不太好,所以换成0.7%的跑 我觉得是dna没有提好,所以重提了一次,1%的胶 第一次提dna,不知道经验,请高人指点,能不能去做pcr试试,可能是什么原因没有提出来,我的样品放在-80时间不长。。。 skyhater 总dna电泳?什么目的? skyhater
实验试剂 TENP缓冲液(50 mmol/L Tris, 20 mmol/L EDTA, 100 mmol/L NaCl, 1% PVP, pH 10.0) PBS缓冲液(137 mmol/L NaCl, 2.7 mmol/L KCl, 10 mmol/L Na2 HPO4 , 2 mmol/L KH2 PO4 , pH 7.4) DNA提取缓冲液(100 mmol/L Tris, 100 mmol/L EDTA
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