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详询
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广州市左克生物
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详询
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48T/盒
转基因植物NOS 终止子恒温检测荧光型试剂盒使用说明书
【产品名称】
转基因植物 NOS 终止子恒温检测荧光型试剂盒
【产品货号】
WLDR21058K48
【包装规格】
48 份/盒
【预期用途】
本试剂盒仅供科研使用。
本试剂盒适用于转基因植物中 NOS 终止子基因的定性检测。
【检测原理】
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术:在常温恒温下(一般为 39 ºC~42 ºC),反应体系中的重组酶、单链 DNA 结合蛋白和 DNA 聚合酶等利用特异性引物进行快速核酸扩增反应。随着扩增产物积累,设计的特异性分子探针在核酸外切酶的作用下释放荧光信号,使用荧光检测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。
【主要组成成分】
组成:E buffer、B buffer、正对照模板(058)、试剂
含量:1.0 ml *2 管、1.0 ml *2 管、100 μL *1 管、48 份
主要成分:反应缓冲液、Mg2+等、合成质粒、酶、dNTP等
【储存条件及有效期】
1.储存条件:温度 ≤ -20 °C 恒温环境,避光保存,避免重压;
2.产品有效期:14 个月;
3.生产日期见外包装。
【适用仪器】
1.适用于 Applied Biosystems 7500、 QuantStudio 3/5 、QuantStudio 6/7 Flex等荧光定量 PCR 仪;
2.适用于我司的 WL-16-III 等恒温荧光检测仪。
【样本要求】
1.按照相关标准采集样本;
2.样本采集后建议尽快检测,24 小时内进行检测样本可暂时保存于 4 ºC;长时间保存则置于-70℃以下,并避免反复冻融;
3.如使用样本保存液或快速释放剂等处理样本,注意影响蛋白活性的物质如酸、碱、盐、表面活性剂等残留对试剂性能的影响。


【检验结果的解释】
1.样本采集、运输、保存不当,试剂运输、保存、配制不当都可能会影响实验结果,甚至会导致假阴性结果;
2.如果实验室污染、试剂污染、样品交叉污染,可能出现假阳性结果;
3.因方法学差异,使用市面上部分品牌的荧光 PCR 仪可能出现荧光曲线异常现象,推荐使用我司设备或 Applied Biosystems 系列荧光定量 PCR 仪。
【注意事项】
1.使用前请仔细阅读说明书,严格按照操作步骤进行操作;
2.样品处理应该严格按照生物安全规范操作,实验过程中应穿着工作服,戴一次性手套,实验分区域进行避免交叉污染;
3.使用有效期内试剂,且各组分不得与其他批号混用,试剂盒各组分使用前室温充分融化后混匀,短暂离心后使用;
4.反应管中尽量避免气泡存在,管盖盖紧,反应结束后扩增管置于密封袋内,按要求丢弃处理;
5.本试剂盒仅用于科研使用,不作为临床诊断使用。
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文献和实验源序列,这些序列通常不存在于野生型植物中。其中,这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来,则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测,逐渐成为科学家们关注的焦点。目前,已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列,选择退火位点生成单一DNA片段,以便于结果的分析。PCR反应
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