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- 详细信息
- 文献和实验
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99
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详询
- 供应商:
广州市左克生物
- 保存条件:
详询
- 规格:
48T/盒
【产品名称】
通用名称:RNA 恒温快速扩增试剂盒(胶体金试纸条型)-II
【包装规格】
货号:WLRN8209KIT
规格:48 份/盒
【原理概述】
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术:在常温恒温下,特殊修饰的反转录酶利用特异性引物和模板RNA合成cDNA链,反应体系中的重组酶、单链 DNA 结合蛋白和 DNA 聚合酶以新合成的 cDNA 链为模板进行快速核酸扩增反应。依赖nfo 酶的作用,加入根据模板设计的特异的分子探针,使用胶体金技术(三明治夹心法)可以对最终结果进行检测。
【产品特点】
本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短(仅需 12 min)等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。本试剂对设备要求低,金属浴、水浴锅等即可进行反应操作,无需购买 PCR 扩增仪等价格高昂的专属设备。
【引物设计】
建议使用长度在 30-35 bp 的引物,引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度;下游引物的 5’端标记一个修饰基团(常用生物素)。引物设计避免形成二级结构而影响扩增;扩增子长度建议在 150-500 bp。
【荧光探针设计】
在上下游引物中间,设计一段长度为46-52nt与目的片段互补的序列;5’端修饰一个抗原标记(典型 FAM);在 5’端和 3’末端的中部位置标记一个 dSpacer(四氢呋喃,THF),作为 nfo 的识别位点;3’末端标记一个修饰基团,例如胺基、磷酸基团或 C3-Spacer 等。

【试剂盒储存】
1.运输温度:≤ 20 ºC的恒温环境;
2.储存条件:储存温度 ≤ -20 °C(± 5 °C)恒温环境,避光保存,避免重压、反复冻融;
3.产品有效期:14个月;
4.生产日期见外包装。
【注意事项】
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由于试剂盒灵敏度非常高,在进行反应时请注意避免核酸污染,并设置空白对照;
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使用时请取出实验所需的 MIRA 反应单元的数量,剩余部分请置于存储条件下。
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文献和实验分子的RNA(200nt以上),小分子RNA往往被淘汰掉,因而不适用于小分子RNA的分离纯化。有机溶剂抽提能够较好的保留小分子RNA,但是后继的沉淀步骤比较费时费力。MirVana miRNA Isolation Kit是采用玻璃纤维滤膜离心柱(glass fiber filter,GFF),既能够有效富集10mer以上的RNA分子,又能够兼备离心柱快速离心纯化的优点,是一个不错的选择。对于特别稀有的分子,由于需要分离大量RNA而导致高背景而降低灵敏度,还可以进一步富集10mer到200bp的小分子RNA
实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法 实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70%乙醇洗涤沉淀,这样就可以得到比较纯净的总RNA. 实验步骤: ① 先在研钵中加入液氮,再将组织剪成小块在液氮中磨成粉末,用液氮预冷的药匙取50~
HNADOCK - 一个研究 RNA 与 DNA/RNA 互作的平台
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