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- AAT Bioquest
- 进口
- 23103
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Phalloidin-California Red Conjugate
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
300Tests
| Ex (nm) | 592 | Em (nm) | 609 |
| 分子量 | ~1000 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品外观形态：液体（注：鬼笔环肽系列产品有固体和液体两种，液体为DMSO溶解后的产品，则不需再溶解。）
鬼笔环肽-加州红标记探针会选择性地结合F-肌动蛋白。以纳摩尔浓度使用，鬼笔环肽衍生物是方便的探针，用于标记，鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片中的F-肌动蛋白，细胞培养物或无细胞实验。肌动蛋白是一种球状的，大约42kDa的蛋白质，几乎存在于所有真核细胞中。 它也是高度保守的蛋白质之一，与藻类和人类不同的物种相差不超过20％。 肌动蛋白是细胞中两种细丝的单体亚基：微丝，细胞骨架的三个主要组分之一，以及微丝，是肌细胞中收缩装置的一部分。 因此，肌动蛋白参与许多重要的细胞过程，包括肌肉收缩，细胞运动，细胞分裂和胞质分裂，囊泡和细胞器运动，细胞信号传导，以及细胞连接和细胞形状的建立和维持。
鬼笔环肽比肌动蛋白单体更紧密地结合肌动蛋白丝，导致肌动蛋白亚基从丝状末端解离的速率常数降低，基本上通过防止丝解聚来稳定肌动蛋白丝。此外，发现鬼笔环肽抑制F-肌动蛋白的ATP水解活性。鬼笔环肽在细胞中以不同浓度起作用不同。当以低浓度引入细胞质时，鬼笔环肽将较少聚合形式的细胞质肌动蛋白以及微丝蛋白聚集成聚集的肌动蛋白聚合物的稳定“岛”，但它不会干扰应力纤维，即厚的微丝束。鬼笔环肽的性质是通过用荧光类似物标记鬼笔环肽并用它们染色肌动蛋白丝用于光学显微镜来研究F-肌动蛋白在细胞中的分布的有用工具。鬼笔环肽的荧光衍生物已经证明在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及在体外可视化单个肌动蛋白丝方面非常有用。荧光鬼笔环肽衍生物已被用作高分辨率肌动蛋白研究中的重要工具。鬼笔环肽-加州红标记探针是AAT Bioquest为多色成像应用提供的一种荧光鬼笔环肽衍生物。
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样品分析方案
概述
在微孔板孔中制备样品
从板中的样品中取出液体
添加鬼笔环肽-加州红溶液（100μL/孔）
在室温下染色细胞20至90分钟
清洗细胞在显微镜下检查样品
注意：将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。
操作步骤
1.将 1 μL 的鬼笔环肽-加州红溶液添加到 1 mL 含 1% BSA的PBS 中。
注意1：鬼笔环肽缀合物的未使用的储备溶液应等分并储存在-20℃，避光。
注意2：不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备鬼笔环肽缀合物工作溶液的浓度。
2.染色细胞：
2.1执行甲醛固定。 在室温下将含3.0-4.0％甲醛的细胞在PBS中孵育10-30分钟。
注意：避免使用任何含甲醇的固定剂，因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。
2.3可选：在PBS中加入0.1％Triton X-100固定细胞3至5分钟，以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。
2.4将100μL/孔（96孔板）鬼笔环肽缀合物工作溶液加入固定的细胞，并在室温下染色细胞20至90分钟。
2.5在加上盖玻片之前，用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以除去过量的鬼笔环肽缀合物，然后在显微镜下进行，密封和成像。
参考文献
Biomaterial Surface Can Modify HUVEC Morphology and Inflammatory Response by Regulating MicroRNA Expression
Authors: Shuangying Gu, Baoxiang Tian, Weicong Chen, Yue Zhou
Journal: Journal of Biosciences and Medicines (2017): 8
Cell-Permeable, MMP-2 Activatable, Nickel Ferrite and His-tagged Fusion Protein Self-Assembled Fluorescent Nanoprobe for Tumor Magnetic Targeting and Imaging
Authors: Lu Sun, Shuping Xie, Jing Qi, Ergang Liu, Di Liu, Quan Liu, Sunhui Chen, Huining He, Victor C Yang
Journal: ACS Applied Materials & Interfaces (2017)
DNA Double-Strand Breaks Induce the Nuclear Actin Filaments Formation in Cumulus-Enclosed Oocytes but Not in Denuded Oocytes
Authors: Ming-Hong Sun, Mo Yang, Feng-Yun Xie, Wei Wang, Lili Zhang, Wei Shen, Shen Yin, Jun-Yu Ma
Journal: PloS one (2017): e0170308
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Authors: Kun Xiong, Qingbo Fan, Tingting Wu, Haishan Shi, Lin Chen, Minhao Yan
Journal: Materials Science and Engineering: C (2017)
Enhanced osteointegration of tantalum-modified titanium implants with micro/nano-topography
Authors: Junyu Shi, Xiaomeng Zhang, Shichong Qiao, Jie Ni, Jiaji Mo, Yingxin Gu, Hongchang Lai
Journal: RSC Advances (2017): 46472--46479
Grafting of Ring-Opened Cyclopropylamine thin films on Silicon (100) Hydride via UV Photoionization
Authors: Joline Tung, Jing Yuan Ching, Yoke Mooi Ng, Lih Shin Tew, Yit Lung Khung
Journal: ACS Applied Materials & Interfaces (2017)
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文献和实验微丝的显示方法步骤：1. 用PBS液漂洗盖片培养的原代细胞3次，每次30s； 2. 用2%的甲醛/PBS液固定原代细胞3min； 3. 用0.5%的三硝基甲苯/PBS处理3次，每次10min； 4. PBS漂洗3次； 5. 用罗丹明(rhodamine)标记的鬼笔环肽(phalloidin)(1：10)室温中反应15min； 6. PBS漂洗3次； 7. 60%甘油+荧光防淬剂封片； 8. 荧光显微镜观察； 微管的显示方法：
的细胞时，模拟流动状态显得尤其重要，如内皮细胞或上皮细胞。 下图实验显示了静态和流动状态下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的免疫荧光图像，显示在流体环境和静止环境下细胞的不同状态。 用鬼笔环肽（红色）染色细胞骨架 F-肌动蛋白。 VE-钙粘蛋白（绿色）标记粘附连接点。 使用 DAPI（蓝色）染色细胞核。上：HUVEC，静态培养，0 dyn / cm， 2.5 天， μ-slide 35mm 培养皿下：HUVEC，流体剪切力 10 dyn /cm²环境，2 天，μ-Slide I 0.4 Luer二
-actin加到(+)极的速度要比加到(-)极的速度快5-10倍。溶液中ATP-肌动蛋白的浓度处于临界浓度时，ATP-肌动蛋白在(+)端添加，而从(-)端分离，表现出“踏车”现象。微丝的装配细胞中大多数微丝结构处于动态的组装和去组装过程中，并通过这种方式实现其功能。细胞松弛素（cytochalasin）可切断微丝纤维，并结合在微丝末端抑制肌动蛋白加合到微丝纤维上，特异性的抑制微丝功能。鬼笔环肽（phalloidin）与微丝能够特异性的结合，使微丝纤维稳定而抑制其功能。荧光标记的鬼笔环肽可特异性的显示微丝
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