- ￥2312
- AAT Bioquest
- 进口
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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Cell Meter™ Caspase 9 Activity Apoptosis Assay Kit *Blue Fluorescence*
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
200Tests
| Ex (nm) | 341 | Em (nm) | 441 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光* 是通过测量Caspase 9的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 9是CED-3亚家族中的一员。活化的Caspase 9能切割下游caspases,例如caspase-3,-6和-7，起始Caspase级联反应。在正常发育的神经系统中，活化的Caspase 9是凋亡所必需的。Caspase 9具有底物的选择性，其识别底物基序为Leu-Glu-His-Asp (LEHD)。本试剂盒利用Ac-LEHD-AMC作为荧光指示器来检测caspas-9的活性。通过caspas-9的切割AMC产生强蓝色荧光，eX/eM = 350/450 nm。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分。该实验稳定、快速且适应高通量筛选的需求。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-9的活性还能筛选caspas-9的抑制剂。很多实验室利用本试剂盒进行高通量抑制剂的筛选。，为您提供优质的Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒。
点击查看光谱
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 375 nm |
| Em： | 435 nm |
| Cutoff： | 420 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 顶/底读模式 |
样品实验分析
简要概述
用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
加入等体积的Caspase 9工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
在室温下孵育30-60分钟
监测Ex / Em = 375/435 nm处的荧光（截止= 420 nm）
工作溶液配制
将50μLCaspase9底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 9工作溶液。 避光。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。
操作步骤
1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。
2.将细胞板在5％CO2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间（对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。
3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 9工作溶液。
4.将Caspase 9工作溶液板在室温下孵育至少1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 9工作溶液前10分钟，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂，以确认对胱天蛋白酶9样活性的抑制作用。
5.将细胞板（特别是非贴壁细胞）以800rpm离心2分钟。
6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 375 / 435nm（截止= 420nm）下监测荧光强度。
数据分析
| 图1.使用Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 9活性 蓝色荧光 。 将Jurkat细胞以300,000个细胞/90μL/孔接种在Costar黑色壁/透明底96孔板中。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞4小时。 加入半胱天冬酶9工作溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。 使用FlexStation 酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em = 375 / 435nm（截止值= 420nm）下测量荧光强度。 |
参考文献
Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13--26
Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)
microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317--324
Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
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Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440--452
Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
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Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668--675
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Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391--L402
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Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)
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文献和实验细胞术已经成为凋亡分析的重要检测手段。PharMingen公司提供了许多从多种角度研究凋亡的试剂系统，包括小鼠、大鼠和人类蛋白抗体：Fas和Fas配体、TRAIL和DR3/DR4、Bcl-2家族、Caspase酶家族及其它信号蛋白；再有，提供了多种流式细胞仪检测试剂盒，包括：Caspase-3 Assay Kit、APO-BRDU和APO-DIRECT Kit、Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit；另外，还提供了mRNA分析试剂——RiboQuant Rnase
(Hoechst 33258), DAPI。三种种染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用时用PBS稀释，终浓度为10 ug/ml。DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用终浓度一般为10 ug/ml。结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased
染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342)，HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种种染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。 Hoechst是与DNA特异结合的活性
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