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- AAT Bioquest
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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
MycoLight™ Flow Cytometric Live Bacteria Assay Kit
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
100Tests
| Ex (nm) | 498 | Em (nm) | 526 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒，MycoLight流式细胞术活菌分析试剂盒提供了一种简便的方法，可根据细胞内酯酶活性评估细菌活力。 MycoLight™520是一种非荧光酯酶底物，可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。 通过细菌细胞内非特异性酯酶水解后，会产生绿色荧光产物，并在细菌内积累。 与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比，该试剂盒可提供更明亮，更稳定的信号，具有更低的背景和更容易的染色方案。，为您提供优质的MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒。
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适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 530/30 nm |
| 通道: | FITC 通道 |
样品实验方案
简要概述
1.准备100X染料储备溶液。
2.准备细菌样品。
3.将细菌样品与MycoLight 520在黑暗中于37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟。
4.通过带有FITC通道的流式细胞仪分析样品。
溶液配制
1.储备溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1MycoLight 520储备液（100X）：
将100 µL DMSO（组分C）加入一小瓶MycoLight 520（组分A）中，制成100X储备液。
样品示例及操作
1.准备细菌样品，浓度范围为106到108个细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基，然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液（组分B）中。注意：在波长= 600 nm（OD600）处测量细菌培养物的光密度，以确定细胞数。对于大肠杆菌培养，OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。
2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液，然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液（组分B）中，以使处理后样品中的细菌浓度与活菌浓度相同。注意：开始治疗之前，请确定细菌培养物的浓度。注意：死细菌可以作为阴性对照，建议使用70％乙醇杀死细菌30分钟，然后煮沸60分钟。
3.活/死细菌混合物制备示例：混合7种不同比例的细菌悬液，如表1所示，每个样品的总体积为200 µL。
4.将2 µL 100X MycoLight 520储备液加到200 µL Assay Buffer中的细菌样品中。
5.充分混合并在黑暗中于37°C孵育5-10分钟，或在室温孵育60分钟，以获得最佳染色效果。
6.在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加300 µL分析缓冲液（组分C）以增加体积。
7.用流式细胞仪通过FITC通道（488/530 nm）监测细菌的荧光。注意：要排除杂物，建议将流式细胞仪的阈值设置为以下值：FSC> 10,000，SSC> 5,000。注意：MycoLight 520的效率高度依赖菌株，因此应相应优化染色条件。
表1.混合以达到各种活/死比的活样本和死样本的示例体积
| 活细胞比例 | 样品死亡µL | 活样品µL |
| 0:100 | 0 | 200 |
| 10:90 | 20 | 180 |
| 30:70 | 60 | 140 |
| 50:50 | 100 | 100 |
| 90:10 | 180 | 20 |
| 100:0 | 200 | 0 |
参考文献
Seminal plasma affects the survival rate and motility pattern of raw llama spermatozoa
Authors: F. G. Fumuso
Journal: Anim Reprod Sci (2018): 99-106
New fluorescein precursors for live bacteria detection
Authors: C. Guilini
Journal: Anal Chem (2015): 8858-66
Protective effects of antithrombin on free groin flaps after secondary venous stasis in the rat model
Authors: J. Wallmichrath
Journal: J Plast Reconstr Aesthet Surg (2014): 707-11
Comparison of different live/dead stainings for detection and quantification of adherent microorganisms in the initial oral biofilm
Authors: P. N. Tawakoli
Journal: Clin Oral Investig (2013): 841-50
A multiplexed immunofluorescence method identifies Phakopsora pachyrhizi Urediniospores and determines their viability
Authors: R. Vittal
Journal: Phytopathology (2012): 1143-52
Rapid flow cytometric method for viability determination of solventogenic clostridia
Authors: M. Linhova
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2012): 307-11
Expansion of chondrocytes in a three-dimensional matrix for tracheal tissue engineering
Authors: T. Walles
Journal: Ann Thorac Surg (2004): 444-8; discussion 448-9
Functional changes and motility characteristics of Japanese Black bull spermatozoa separated by Percoll
Authors: K. Suzuki
Journal: Anim Reprod Sci (2003): 157-72
Validation of flow cytometry for assessment of viability and acrosomal integrity of dog spermatozoa and for evaluation of different methods of cryopreservation
Authors: A. I. Pena
Journal: J Reprod Fertil Suppl (2001): 371-6
Kinetic and temporal factors influence chilling injury to germinal vesicle and mature bovine oocytes
Authors: Y. Zeron
Journal: Cryobiology (1999): 35-42
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文献和实验流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时，如何进行流式凋亡分析？
随着生物研究进入基因时代，转染技术的应用越来越广泛。在此过程中，通常会引入 GFP（绿色荧光蛋白）标签，去验证转染是否成功。 在之前的流式课堂中，我们曾多次提到过流式配色问题。今天，就来带大家看看，带有 GFP 标签的细胞，在流式凋亡检测中，应该如何配色和分析结果。 一、如何选择试剂盒 挑选试剂盒时，需要选择干扰少的荧光组合。GFP 的激发/发射波长为 488/510，通常在流式细胞仪中的检测通道为 FL1。因此，我们不能选择荧光标签为FL1检测通道的凋亡检测试剂盒，如 AF488
示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
一、样本准备 详见流式细胞术样本制备技术、流式实验样本制备方法及注意事项 收集细胞，200 目筛网过滤，收集滤液，300 g 离心 5 min，弃上清 向细胞中加入适量细胞染色 buffer（或含 1%BSA 的 PBS），用移液枪轻轻吹打细胞重悬 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后，调整细胞浓度约为 1 × 107/mL 三、设置实验分组 四、封闭 Fc 受体 封闭 Fc 受体能减少染色过程中的非特异性染色。 小鼠中，纯化的 CD16/CD32 单抗能和 Fc
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