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- 2026年02月04日
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上海达为科生物科技有限公司
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小鼠肿瘤模型
一、小鼠肿瘤模型的核心分类体系
1. 按发生机制分类
| 类型 | 构建原理 | 代表模型 | 优势 | 局限性 |
|---|---|---|---|---|
| 自发性模型 | 未经人工干预自然发生 | KM小鼠乳腺癌、自发性白血病 | 病理进程接近人类，微环境真实 | 周期长（6-12个月），成本高 |
| 诱发性模型 | 化学/物理/生物因素诱导 | DEN诱导肝癌、紫外线诱导皮肤癌 | 可模拟环境致癌因素，病理机制明确 | 个体差异大，致癌物毒性强 |
| 移植模型 | 肿瘤组织/细胞系植入免疫缺陷或同系动物 | CDX（细胞系移植）、PDX（患者来源移植） | 周期短（2-4周），可高通量筛选药物 | 微环境失真，免疫互作缺失 |
| 基因工程模型（GEM） | CRISPR/Cas9编辑或转基因技术 | KrasG12D突变肺癌模型 | 时空可控突变，模拟多阶段癌变 | 构建复杂（6-12个月），成本高 |
注：移植模型占主导（>70%研究），因周期短、可重复性强；GEM模型适用于机制研究。
二、关键模型构建技术详解
1. 移植模型技术路线
| 移植类型 | 操作要点 | 适用研究 | 典型案例 |
|---|---|---|---|
| 皮下移植 | 接种于腋下/腹股沟皮下（细胞量：5×10⁵-1×10⁶/鼠） | 药物初步筛选，生长曲线分析 | Huh7肝癌细胞→BALB/c裸鼠 |
| 原位移植 | 开放手术植入靶器官（如肝/肺/胰腺） | 微环境影响、转移机制研究 | PANC-1胰腺癌细胞→C-NKG鼠胰腺 |
| 转移模型 | 尾静脉注射（肺转移）、胫骨注射（骨转移）、脾脏注射（肝转移） | 转移靶向性及抑制策略 | B16黑色素瘤→C57BL/6尾静脉→肺转移 |
| 血液肿瘤 | 静脉输注淋巴瘤细胞（如Raji-Luc细胞） | 血液系统肿瘤治疗响应 | Raji-Luc→NOD/SCID鼠 |
原位移植存活率关键：严格无菌操作+术后镇痛（布洛芬饮水），死亡率可降至<15%。
2. 基因工程模型构建策略
- CRISPR/Cas9体内编辑：
腺病毒载体递送sgRNA至靶器官（如肝），诱导特异性基因突变（如Tak1敲除→肝癌） - 条件性诱导系统：
Tet-On系统控制致癌基因（如Myc）表达，实现肿瘤发生时空调控 - 复合突变模型：
KrasG12D+Trp53-/-（KPC模型）模拟胰腺导管腺癌
3. 特殊模型构建创新
- 荧光标记模型：
Luciferase/GFP标记肿瘤细胞（如MCF-7-luc），活体成像定量转移 - 人源化免疫模型：
PBMC或CD34+干细胞移植至NSG小鼠，重建人免疫系统→评估免疫治疗
三、模型选择决策矩阵
| 研究目标 | 模型 | 辅助验证模型 | 关键评估指标 |
|---|---|---|---|
| 药物高通量初筛 | CDX皮下模型 | PDX模型 | 抑瘤率（TGI）、肿瘤体积 |
| 肿瘤-微环境互作 | 原位PDX/GEM模型 | 人源化免疫模型 | 免疫浸润单细胞测序、胶原重塑分析 |
| 转移机制研究 | 尾静脉/原位移植模型 | 自发转移GEM模型 | 转移灶数量（CT/MRI）、循环肿瘤细胞 |
| 致癌物环境暴露模拟 | DEN诱导肝癌模型 | 紫外线皮肤癌模型 | 肿瘤发生率、组织异型性 |
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文献和实验相关实验
重。因为出瘤已经是接种后的第6天左右了，第10天就结束时间，瘤体积的数据意义就不大。小鼠肿瘤很难剥，这是没有办法的，只能耐心，没有太好的办法，剥多了以后，手上会掌握一些巧力，有一些帮助，但是我们还是很头痛小鼠肿瘤试验结束。肿瘤组织周围经常会有一些血窦的形成，弄破后会有血和黄色的液体流出，正常的，但是剥瘤子的时候不要把它弄破，会严重影响瘤重。按照SFDA的规定，平均瘤重小于1g，或者单个瘤重小于200mg，认为肿瘤生长不良，试验作废。小鼠模型第二类是以lewis肺癌、B16为代表的，他们的宿主多为C57
小鼠肿瘤样本制备 颈椎脱臼法将荷瘤小鼠处死，75% 酒精浸泡 5 min，取出小鼠置于无菌操作台上。 左手持镊子，右手持弯剪，沿肿瘤边缘剪下长约 1cm 的口子，可清晰看见肿瘤附着于皮下，沿肿瘤边缘轻轻剪开连接处，剥离肿瘤。 将剥离的肿瘤放入100 mm 的培养皿中，并在室温下加入 5~10 mL 的 1640 基础培养基。 单细胞悬液的制备 A.混合酶消化法 待所有肿瘤剥离完毕后，将肿瘤转移至 1.5 mL EP 管中，手持弯剪将肿瘤充分剪碎，边剪边加入1640基础培养基，静置数秒
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