大鼠脊髓挫伤模型

传统Allen法步骤：

1. 麻醉与暴露：
   • 腹腔注射戊ba比妥钠（45mg/kg），俯卧位固定。
   • 以T9/T10为中心作2-3cm纵切口，钝性分离棘旁肌，咬除棘突及椎板，暴露硬脊膜。
2. 挫伤操作：
   • 调节打击装置（如10g重杆），从25mm高度自由落体撞击暴露脊髓。
   • 成功标志：撞击瞬间大鼠身体抖动、双后肢弹动、摆尾，局部脊髓紫黑色变，术后后肢瘫痪。
3. 术后处理：
   • 逐层缝合肌肉皮肤，注射青霉素抗感染，人工排尿直至反射恢复。

改良技术提升可操作性：

• 胸椎揭盖开窗法：
  替代传统蚕食法椎板切除，手术时间从47±10min缩短至20±7min，出血量减少50%，感染率与死亡率显著降低。
• 微创半椎板切除：
  切口仅0.8cm（vs传统2.5cm），单侧T10椎板切除，减少脊柱畸形风险。

术后评估指标与方法

1. 运动功能评估：BBB评分

• 评分标准：0分（无后肢运动）至21分（协调步态），分三阶段：
• 0-7分：关节轻微活动，无负重；
• 8-13分：间歇性负重行走；
• 14-21分：协调步态与足趾清整能力恢复。
  • 操作流程：术前适应性训练，术后每周在开放场地测试，由双盲观察者评分。

2. 步态分析（TreadScan系统） 

定量参数包括：

• 步长缩短、瞬间跑速下降、正常步序比降低、最小纵向偏差增大、后肢脚间距增宽。
  优势：克服人为误差，实现运动参数数字化。

3. 组织病理学评估

• 染色技术：
• 铜银染色/Luxol固蓝染色：观察神经元退变、髓鞘脱失。
• 尼氏染色：检测尼氏体崩解及神经元数量。
  • 形态计量：
• 测量损伤中心灰质/白质残存面积（如颈半挫伤模型：中度灰质1.45±0.11mm²，重度1.10±0.05mm²）。
• 空洞体积量化（Western blot检测凋亡蛋白如Caspase-3、Bax/Bcl-2比值）。
  
   

4. 高级影像与神经示踪

• 弥散张量成像（DTI） ：显示神经束走向，评估轴突完整性。
• BDA顺行示踪：标记皮质脊髓束，追踪损伤后轴突再生能力。