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- 上海科梦达生物
- v15514760315
- K2314
- 2025年09月18日
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参考说明书
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上海科梦达生物
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20次
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上海科梦达生物主营：动物血清血浆全血，各种浓度红细胞，ELISA试剂盒，生化试剂盒，PCR试剂盒，胎牛血清（Gibco/BI/Gemini/PAN等），细胞（细胞系，原代细胞），培养基，各类抗原，抗体，抗血清，感受态细胞，考马斯亮蓝蛋白快速染液等，液相检测， 气相检测 ，液质联用检测 ，常规生理生化测定，土壤检测，elisa检测服务（购买本公司ELISA试剂盒免费代测）
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文献和实验或存放不当：质粒提取试剂盒成分复杂且保存条件不同，有的试剂还容易出现浑浊。在使用之前需要检查试剂是否保存得当，如果出现浑浊，可参考试剂盒说明书，进行 37℃ 温浴至溶液澄清，再冷却至室温使用。 ⑦洗脱液体积不合适：洗脱液使用体积过大会导致提取浓度偏低，过小会导致洗脱不充分，产量过低。建议参考试剂盒说明书来确定洗脱体积，如果洗脱浓度偏低，可以重复洗脱一次； ⑧洗脱液未添加到硅胶膜中心：可能会导致洗脱液覆盖不完全，导致洗脱效率降低。此外洗脱液可以使用碱性洗脱缓冲液或者无核酸酶的水，避免使用 PH＜
上， 30 ℃培养平板至出现菌落；吸取每管剩余的 40 μ l 混合物用无菌的 TE(pH7.5) 或水做一系列的 1 ： 10 稀释，每份稀释液取 100 μ l 取在 100 mm CM(Glu)-Ura-His-Trp 平板上， 30 ℃培养平板至出现菌落。 初级转化子的收获和富集 9． 通过摇动法或刮擦法收获文库。 10． 如果需要，在每个装有酵母细胞的锥形管中加无菌 TE （ pH7.5 ）或无菌水至 40 ～ 45 ml ，振荡
过滤，-20℃保存; 2. 将DNA直接加在冻结的酵母细胞上是本实验的关键之处（即使在冰上解冻的待转化细胞，其摄取外源DNA的能力也在解冻过程中迅速下降；如进行多样品的转化，建议按6样品/组进行）; 待转化毕氏酵母的制备 1. 接种环接种Pachia pastoris于YPD平板，30℃培养2d; 2. 挑取单克隆酵母菌株于10mlYPD培养基中，30℃振荡培养过夜； 3. 取步骤2中小量菌液接种到100mlYPD培养基中振荡培养，待其OD值从0.1升到0.5～
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