人子宫宫颈组织切片（冷冻/石蜡）

Visium FFPE 的风很大，你真的了解吗？

的长期保存样本的方法，该方法可将珍贵样本保存几年甚至10年以上，且大多样本通常有对应的临床匹配追踪数据，若能再结合高通量测序数据，对疾病研究和治疗来说都有非常大的意义。 但也因珍贵样本保存时间长，FFPE组织内存在RNA/DNA降解的情况，片段化的RNA用oligoT探针捕获会丢失很多信息。历经一年时间，空间转录组技术已针对FFPE样本提出了解决方案，不在局限于冰冻组织切片，石蜡样本也可以通过空间转录组技术获取基因表达和空间定位的全部转录组信息，区分和定位功能基因在特定组织区域内的活跃表达情况

免疫组化经验总结

液，然后一手拿住盖片某一拐角，而另一手拿对面的那个拐角，接近封片液近端的拐角先降低，直至接触到液体时为止；当发现液体接触面在不断弥散时，则可以缓慢降低另一拐角，这样一般不会产生气泡。 2.  免疫荧光方法中的重要环节   1）冰冻切片制备 建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。 2）组织切片固定 切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定 5-10 min，尤其要较长时间保存

如何进行原位杂交

甲醛磷酸缓冲液中1～2h，在冷冻前浸入15%蔗糖溶液中，置4℃冰箱过夜，次日切片或保存在液氮中待恒冷箱切片机或振荡切片机切片。组织也可在取材后直接置入液氮冷冻，切片后才将其浸入4%多聚甲醛约10min，空气干燥后保存在-70℃。如冰箱温度恒定，在-70℃可保存数月之久不会影响杂交结果。在病理学活检取材多用福尔马林固定和石蜡包埋，这种标本对检测DNA和mRNA有时也可获得杂交信号，但石蜡包埋切片由于与蛋白质交叉连接的增加，影响核酸探针的穿透，因而杂交信号常低于冰冻切片。同时，在包埋的过程中可减低mRNA