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10 UL
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文献和实验灌注可能不足以固定目标组织。在这种情况下,可以将解剖后的组织浸入固定液中。例如,4%甲醛PBS溶液是组织灌注和浸入固定的常用溶液。 为了增强浸泡固定过程中固定液的渗透性,建议组织厚度不超过10毫米。为达到完全固定,固定液的体积应为组织体积的50-100倍。固定通常在室温下进行4-24小时。优化固定条件至关重要,因为固定不足或过度固定都可能降低或消除组织的免疫反应性。 培养细胞的固定 与组织样本相比,培养细胞可以用浓度较低的固定液在较短时间内固定。例如,在室温下用2%甲醛溶液固定20分钟通常足以保持细胞
Unmasking Solution (10X)Buffer125mlIHC-P15019SAnimal-Free Blocking Solution (5X)Buffer25mlW IHC-P5425SNormal Goat SerumBuffer10mlIHC-P IHC-F IF-P IF-F IF-IC ICW8112SSignalStain® Antibody DiluentBuffer25mlIHC-P8961SProLong®Gold Antifade Reagent
Immunohistochemistry (IHC) of Thymus Frozen Sections
µL of 2º antibody at r.t. as before x5 min. Rinse with PBS as before. Add DAB solution at r.t. x5 min. Rinse in PBS 2x. Step slides through graded EtOH to dehydrate: 70%, 95%, 100% (x3). Toluene (or xylene) (x2). Add
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