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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
133
- 英文名:
pmirGLO
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
质粒干粉
别称:DB00009;pmir-GLO
基因长:
质粒宿主:哺乳细胞
质粒用途:启动子检测
片段类型:miRNA,UTR
片段物种:空载体
原核抗性:Amp
筛选标记:Neo/G418
荧光标记:Fluc,Rluc
启动子:PGK
复制子:pUC
感受态:DH5a
温度:37度
正向引物:PmirGLO-F:GACGAGGTGCCTAAAGGACT
反向引物:pCMV-R:TCCAAACTCATCAATGTATC
注意事项:本产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药。
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文献和实验3 mg/mL 体系内置优化核糖体、全套翻译因子与能量再生系统,底物氨基酸、核苷酸配比精准,普通蛋白表达量远超常规 pET 菌体诱导体系,微量反应也能收获足量蛋白用于 SDS-PAGE、活性检测。 3. 体系灵活开放,适配多元实验需求 无需繁琐菌体操作,50 μL、100 μL 微型体系即可反应,兼容离心管、96 孔板,轻松实现高通量平行筛选;支持质粒、PCR 线性产物、RCA 滚环扩增产物三类模板,无需纯化的 PCR 片段可直接上样,大幅简化模板制备流程。 二、一站式预制体系,新手也能零门槛上手
报告质粒加入过多可能影响Firefly表达,因此内参量需要通过预实验确定。 图2丨双荧光素酶报告基因实验检测原理 二、实验设计:先把报告载体和对照组配完整 1. 转录因子调控实验同时设置WT和MUT 验证转录因子是否通过特定启动子或增强子位点发挥作用时,建议同时设置野生型报告载体(WT)和关键结合位点突变载体(MUT)。 WT与MUT的主要差异应集中在预测结合位点,载体构建完成后通过Sanger测序确认插入方向和突变序列。结果分析时重点比较转录因子对WT和MUT报告
粗心人。这样的错误会给将来的克隆造成麻烦。b)如果打算PCR后直接酶切,不要忘了在酶切位点的外侧再加上保护碱基,不同的酶对于保护碱基的要求是不同的。如果不设计保护碱基,则多半要用TA克隆的方式连接到质粒上,这时要注意Taq 酶的选择。若想在目的序列上附加上并不存在的序列,如限制位点和启动子序列,可以加入到引物5'端而不影响特异性。当计算引物Tm值时并不包括这些序列,但是应该对其进行互补性和内部二级结构的检测。十、有时候,对于引物设计仅了解有限的序列信息。比如,如果仅知道氨基酸序列,可以设计兼并
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