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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Boc-L-4-Cyanophenylalanine
- 库存:
999
- 供应商:
智溯科ZSK
- CAS号:
131724-45-3
- 规格:
10mg///100mg///200mg
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文献和实验pH值至7.4,加水至1L,在1.034?105 Pa高压下蒸气灭菌20min,室温保存。 (2) 封闭液(见表3-3)。 (3) 1%BSA/PBS (4) 一抗试剂和碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的二抗试剂(通常是用辣根过氧化物酶标记的抗免疫球蛋白抗体)。 (5) 碱性磷酸酶底物溶液: ① NBT(氮蓝四唑)溶液:在10ml 70%的二甲基甲酰胺中溶解0.5g NTB; ② BCIP(5-溴-4-氮-3-吲哚磷酸)溶液
30min。 (7)缓冲液i 15min×2室温。 (8)缓冲液III(100mmol/l Tris -HCl, 100mmol/L NaCl, 50mmol/L MgCl 2 ,pH9.5)室温2min。 5.显色 (1)显色液配制:缓冲液III:1ml中加入4.5μl四氮唑蓝(NBT),3.5μl X-磷酸盐(5-溴-4-氯-3吲哚磷酸盐(BCIP配成))。30μl/每张切片,置暗处显色30min到2h。定时抽查切片
(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和蓝色的底物5-溴-4-靛蓝。因此,任何携带lacZ基因的质粒载体转化到β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后,都会在涂有IPTG和X-Gal的培养基平板上形成蓝色菌落。当有外源DNA片段插入到位于lacZ中的多克隆位点后,就破坏了α肽链的阅读框,从而无法形成α互补,不能产生具有功能活性的β-半乳糖苷酶,因此含有外源DNA片段的重组子的克隆在涂有IPTG和X-Gal的培养基平板上是白色
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