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在小鼠免疫应答平衡研究中,IFN-γ 与 IL-4 分别作为 Th1/Th2 细胞的特征性因子,其同步检测对免疫极化机制研究至关重要。本双因子检测服务采用流式细胞微球分析(CBA)技术,通过不同荧光编码微球区分 IFN-γ 与 IL-4,单管样本即可实现同步定量,样本需求量仅 20μL。现货检测 Panel 包含微球偶联抗体、荧光标记检测抗体及稀释缓冲液,无需客户自备试剂。实验室配备高速流式细胞仪,通过自动补偿算法校正荧光干扰。服务适用于过敏性疾病、寄生虫感染等小鼠模型,可分析 IFN-γ/IL-4 比值与免疫极化状态的关联性。

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文献和实验从“单因子”到“全景图”:流式CBA如何用25μL样本解锁数十种细胞因子密码
638 nm及488 nm双激光器的流式细胞仪,并有相应的PE和APC以及APC-Cy7检测通道。 联科生物的CBA试剂盒清单 产品结果示例: 小鼠6因子(货号FC20601)试剂盒中IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12p70、TNF-α、IFN-γ的标曲拟合示意图 与传统ELISA检测的优势对比 核心优势 具体说明 科研价值 单管多检 一管样本同步定量多种目标蛋白(细胞因子、趋化因子等) 无需拆分样本,数据可比性拉满 样本上样量少 单次
)固定能有效保留EYFP荧光,但FoxP3染色的强度和阳性细胞比例却明显下降。同样,CD8⁺ T细胞中T-bet的染色也显著减弱。在已知均一表达RORγt的双阳性(DP)胸腺细胞中,PFA固定严重削弱了RORγt信号;然而,在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠中枢神经系统浸润的CD4⁺ T细胞中,IFN-γ和IL-17A的细胞因子染色在各种胞内染色方法下表现相似。为平衡荧光保留与转录因子检测,研究人员降低PFA浓度并调整固定时间,随后使用试剂盒的Perm缓冲液进行破膜。结果显示,延长固定
。以前向角(FSC)和侧向角(SSC)散射光散点图设门区分淋巴细胞,以CD3和CD8散点图设门区分Th细胞(CD3+CD8-)。最终以IFN-γ和IL-4的散点图表示Th1细胞和Th2细胞。(5)流式细胞术检测小鼠外周血Th1和Th2细胞。分离外周血单个核细胞,加入100ng/ml PMA和1µg/ml 离子霉素刺激5h后,收集细胞。将细胞分为两份,称为对照管和实验管,加入CD4-CYC 10µl,混匀,其余步骤同人的检测。调节仪器的补偿,采用Cellquest软件获取分析细胞。以前向角(FSC
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