- ￥500
- 烜雅生物
- XY-ZL0206
- 国产
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
190
- 英文名：
JM110 Chemically Competent Cell
- 保质期：
２年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
冻存管
英文名称：JM110 Chemically Competent Cell
形式：冻存管
培养基：酵母浸粉：5.0，胰蛋白胨：10.0，氯化钠：10.0，pH：7.0±0.1（25℃）
生长条件：37℃；18-24h；好氧；
存储条件： -80℃
安全等级：0
操作步骤：
1.将感受态细胞放置冰中融化 (或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅 速插入冰中) ，加入目的 DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。
2.42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基LB，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少17h。
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文献和实验实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。实验原理转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。转化中的受体细胞： 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株，常用 RM 符号表示。转化方法：电击
菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征
【交流】转载：JM109，DH5a，BL21这些感受态有何区别
就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征 Xl1-Blue菌株 基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK
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