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- 自体内膜移植诱导子宫内膜异位症模型
- 上海
- 2026年01月08日
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上海达为科生物科技有限公司
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自体内膜移植诱导子宫内膜异位症模型
一、模型定义与核心原理
1. 模型定位
自体内膜移植模型是研究EMT的经典诱发模型，通过手术将动物自体子宫组织或子宫内膜块移植到腹腔内异位部位（如卵巢、肠系膜、腹壁），模拟人类EMT的病理特征：
- 核心机制：基于种植学说，移植的内膜组织在雌激素作用下存活、增殖，形成异位病灶，引发炎症、粘连及疼痛。
- 病理标志：异位囊肿形成（含淡黄囊液）、腺体-间质结构存活、周围组织纤维化粘连。
2. 适用研究场景
| 研究方向 | 具体应用 |
|---|---|
| 病理机制 | 炎症级联反应（TNF-α/IL-6↑）、神经血管新生、纤维化进程 |
| 药物筛选 | 激素类药物（GnRH拮抗剂）、中药复方（如三七）的疗效验证 |
| 生育影响 | 排卵障碍、黄体功能不足、种植后流产机制 |
二、模型构建标准化流程
1. 实验动物选择
| 物种 | 品系与参数 | 选择依据 |
|---|---|---|
| 大鼠 | - 品系：SD/Wistar（最常用） | 子宫内膜结构与人类相似，成本低，饲养简单 |
| - 年龄/体重：8-12周龄，雌性未孕，体重180-300g | ||
| 小鼠 | - 品系：BALB/c、C57BL/6 | 适用于基因修饰研究（如荧光蛋白标记） |
| - 年龄/体重：6-10周龄，体重20-30g |
关键预处理：
- 动情周期同步化：筛选连续2个正常动情周期的动物，造模前24小时灌胃己烯雌酚（10μg/kg）。
- 雌激素预处理：肌注苯甲酸雌二醇（30μg/kg×3天），促进内膜血管化。
2. 手术操作核心步骤
(1) 麻醉与消毒
- 麻醉方案：
- 大鼠：戊ba比妥钠（40mg/kg腹腔注射）或水合氯醛（10%溶液，0.3mL/100g）。
- 小鼠：乌拉坦（1.2g/kg腹腔注射）。
- 术区消毒：碘伏+酒精脱毛，避免感染。
(2) 内膜组织获取与处理
| 方法 | 操作细节 | 优缺点 |
|---|---|---|
| 子宫组织块法 | 切除一侧子宫角→纵向剖开→剪成2×2mm碎片（含肌层） | 操作简单，但易引发出血和粘连 |
| 子宫内膜块法 | 剥离子宫内膜层→剪成1×1mm纯内膜块（避免肌层） | 减少粘连和生殖道变形，但技术难度高 |
(3) 移植部位与缝合技术
-
常用移植部位：
部位 成功率 特点 卵巢包膜下 90%↑ 易形成囊肿，模拟卵巢EMT 子宫骶韧带 85% 粘连风险低 腹壁肌肉层 80% 便于观察和取材 肠系膜 75% 易引发生理功能干扰
缝合要点：
- 使用6-0可吸收缝线，将组织块内膜面朝向浆膜层固定。
- 每只动物移植3-4个位点（提高成模率）。
(4) 术后管理
- 抗感染：青霉素（4万U/kg）或庆大霉素（5mg/kg）腹腔注射×3天。
- 雌激素维持：术后肌注苯甲酸雌二醇（10μg/kg，隔日1次×2周）。
- 恢复条件：单独笼养，恒温（25℃）高湿环境减少应激。
三、模型评估与验证体系
1. 成模标准与时间窗
- 观察周期：术后4-8周为最佳评估期。
- 成功标志：
- 肉眼观：移植灶体积≥8mm³、囊液清亮淡黄、血管新生。
- 病理学：HE染色证实存活腺体与间质细胞。
2. 功能与分子检测
| 检测指标 | 方法 | 阳性表现 |
|---|---|---|
| 病灶体积 | 游标卡尺测量 | 持续增大（>50%基线体积） |
| 炎症因子 | ELISA/RT-qPCR | TNF-α、IL-6、VEGF表达↑2-3倍 |
| 神经浸润 | PGP9.5免疫组化 | 异位灶周围神经纤维密度增加 |
| 激素受体 | ER/PR免疫组化 | 雌激素受体阳性率>60% |
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