组织/细胞RNA提取试剂盒

产品简介

EZ-press Tissues/Cells RNA Purification Mini Kit PLUS是从部分非坚韧的动物组织和5 × 10⁴ ~ 3 × 10⁶个细胞中快速提取得到高质量总RNA的试剂盒，可取代传统TRIzol法提取RNA，且无需异丙醇/乙醇沉淀或使用苯酚、氯仿等有毒物质，极大的简化了提取步骤和缩短实验时间。本产品提供了基因组DNA清除柱，能够快速去除样品中残留的基因组DNA，有效避免了残留基因组DNA对后续实验的影响。提取的总RNA纯度高，完整性好，可用于RT-PCR、qPCR和二代测序等下游实验。

产品组分

组分	EZB-RN9  (6 Preps)	EZB-RN9  (50 Preps)
Lysis Buffer	4 ml	28 ml
Wash Buffer 1	5 ml	40 ml
Wash Buffer 2*1	1.6 ml	13 ml
Elution Buffer	1 ml	10 ml
DNA Removing Spin Columns (with Collection Tubes)	6 Preps	50 Preps
Spin Columns for RNA (with Collection Tubes)	6 Preps	50 Preps

注:*1.首次使用Wash Buffer 2前，须加入瓶身标签体积的无水乙醇并充分混匀（Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4）。

保存条件

DNA Removing Spin Columns (with Collection Tubes)需置于4°C保存，其余组分置于室温（15 ~ 25°C）保存，可稳定保存18个月。过期日期详见产品标签中有效期信息。

产品特点

1. 适用范围广：能够从大部分的动物组织和细胞中提取得到高质量的RNA；
2. 简单、快速：最少15分钟即可获得高质量的RNA，与EZB之前的组织RNA提取试剂盒RN4等相比，操作更简单快速；
3. 纯度高、完整性高：A260/280和A260/230基本在2.0左右，且得到的RNA完整性高，能够满足NGS测序建库的需要；
4. 安全无毒：不含苯酚等，无需氯仿、异丙醇、DEPC水等致癌物质，对身体无害；
5. 基因组充分去除：配有DNA清除柱，可有效去除DNA污染；
6. 所需样品少：最低可提取5万细胞或者1 mg组织（部分组织）的RNA。

实验流程

注意事项

1. 首次使用Wash Buffer 2前，须加入瓶身标签体积的无水乙醇并充分混匀（Wash Buffer 2与无水乙醇的体积比为1:4）。

2. 本产品适用于部分非坚韧的动物组织和细胞RNA提取，每个细胞样品的细胞数建议范围为5 × 10⁴ ~ 3 × 10⁶。组织样品的种类和用量请见下表：

注意：不在表格中的组织，需要先进行预实验，检测是否能够提取，经Nanodrop和琼脂糖凝胶电泳检测合格的，方可用本试剂盒进行RNA提取。

代表性实验结果

1. 使用本试剂盒分别提取不同细胞数的A549细胞以及各种组织的RNA，提取的RNA的浓度、纯度如下表：

2. 琼脂糖凝胶电泳：

细胞样品的RNA各取10 μl，肝、脾、脂肪组织的RNA各取3 μl，心、肾、肺组织的RNA各取10 μl，加6μl DNA上样缓冲液6× loading buffer混匀；RNA上样量为2 ~ 10 μl，电泳电压180 V，电泳时间15 min。 M：DL5000 DNA marker；Lane 1、2、3：本试剂盒提取的200万、20万、5万A549细胞RNA；Lane 4 ~ 9：本试剂盒提取的心、肝、肾、脾、肺、脂肪组织RNA。最终得到琼脂糖凝胶电泳图如下图，结果表明，本试剂盒可从动物组织和细胞中快速提取得到高质量总RNA，提取的总RNA纯度高，完整性好。

 

3. Agilent 2100分析：

分别使用EZB-RN9提取20 mg的心脏组织，10 mg的肝脏、肾脏组织，和100万的A549细胞后，取部分RNA进行琼脂糖凝胶电泳，及使用Agilent 2100生物分析仪进行RNA质量分析的结果如图所下示（Sample/Lane 1、2、3、4分别为：心、肝、肾、细胞）：

 

 

 

由上图可见，本试剂盒提取得到的总RNA的RNA具有优异的完整性，动物组织RNA的RIN值可达7 ~ 8以上，细胞系RNA的RIN值可达9 ~ 10，能够较好地满足NGS建库测序的要求。

 

 

相关详细信息，请查看产品说明书。