人胎盘Cot-1 DNA

Human Cot-1 DNA是一种人胎盘DNA，长度主要在50-300bp 之间，富含大量的重复DNA序列，比如AluI和Kpn家族成员。Human Cot-1 DNA可作为文库筛选探针，筛选体细胞杂合体文库和由体细胞杂合体组成的流式分选染色体文库。其应用范围比较广泛，在原位杂交中，Human Cot-1 DNA可用于抑制与人重复DNA的交叉杂交。在液相杂交捕获中，Human Cot-1 DNA可用于封闭DNA文库中的重复序列，降低文库构建中非特异性捕获概率，提高对目标区域的捕获效率。

试剂经过了严格的质量控制，主要包括通过分光光度计和琼脂糖凝胶电泳对DNA纯度、DNA大小和浓度进行检测，同时进行功能性试验验证和产品批次间稳定性测试。

备注：用于生产这一程序的人源原料对乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）和人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）和2型（HIV-2）的检测呈阴性。

 

产品特点

1. 采用独特的片段化工艺，确保⩾50%片段大小在50-300bp区间。

2. 高纯度：无HIV RNA、HCV RNA、HBV DNA 污染；

3. 自研平台，定制化产品：提供工业级大包装，也可按要求进行不同规格定制。

 

产品信息

货号	60620ES76
规格	500 μL

 

产品参数

参数	规格
浓度	⩾1.0μg/μL
片段分布	50-300 bp
储存缓冲液	10mM Tris-HCl，1mM EDTA,pH8.0

储存条件

-25℃至-15℃避光保存，有效期2年。

 

操作指南

使用前，尽量保证试剂溶液完全融解、无沉淀，充分混匀并瞬时离心至管底部。产品组分使用结束后，请尽快放置于-25℃至-15℃条件下进行保存。

 

原位杂交

1.标记探针DNA和Cot-1 DNA相结合。加入1/10体积的3M醋酸钠（pH 5.50）和2倍体积的无水乙醇。将溶液在

-70℃下放置30 min或-20℃下放置过夜。离心后去除上清液，用70%乙醇清洗2次，干燥颗粒。或者将Human Cot-1 DNA 可以通过乙醇沉淀法浓缩到10mg/mL，并可以直接添加到杂交溶液中。

2.将混合DNA溶解在50%甲酰胺、2×SSC和10%硫酸葡聚糖中，并涡旋混匀。

3.70℃加热5min，使探针和Cot-1 DNA混合物变性。

4.37℃孵育探针和Cot-1 DNA混合物20 min。

5.将细胞或组织切片放入2×SSC和70%甲酰胺中，在70℃孵育2min，使中期染色体变性。

7.添加探针和Cot-1 DNA混合物，盖上盖玻片后，进行密封，并在适当的温度下杂交（通常37℃，但这可能需要针对所使用的特定探针进行优化）。

8.使用与检测方法（荧光、酶或放射性检测）相适应的程序清洗和处理杂交产物。

 

液相杂交捕获

1.Human Cot-1 DNA、DNA探针和封闭试剂放置室温溶解，旋涡振荡混匀并离心，置于冰上备用。

2.反应体系的配制如下：

组分	用量
DNA library	750 ng
Human Cot-1 DNA	5 µg
Blocker (200µM)	3 µL
DNA Probe	500 ng
Buffer	5.5 µL
Nuclease-free water	Up to 28.5µL
Total	28.5 µL

3.涡旋振荡混匀，瞬时离心至管底部。

4.将混合物在95℃孵育5min。

5.将混合物在60℃杂交16h以上。

 

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品仅作科研用途！

Ver.CN20250527