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BrainVTA
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中和抗体类假病毒产品
简介
中和抗体是由B淋巴细胞分泌的可溶性蛋白,能够特异性识别病原体(如病毒、细菌)表面抗原,通过阻断其与宿主细胞受体的结合,阻止病原体入侵和复制,是评估疫苗效果和免疫应答的核心指标。常用的中和抗体检测方法大致可归为三种:真病毒中和实验、Elisa中和实验、假病毒中和实验(Pseudovirion-BasedNeutralizationAssay ,PBNA)。
真病毒中和实验:直接使用活病毒来完全模拟自然感染过程,从而检测中和抗体阻断病毒入侵宿主细胞的能力。然而,由于真病毒具有传染性和致病性,对实验室等级要求较高(高致病性病毒需在BSL-3实验室操作)。
Elisa中和实验:具有无需细胞培养、检测速度快、安全性高等特点。然而,其可能漏检非结合型中和抗体,且灵敏度不足,易出现假阳性或假阴性的错误结果。
PBNA:假病毒无自主复制能力,生物安全性较高,可在BSL-2实验室操作;可实现高通量与自动化——基于荧光素酶(Luc)或绿色荧光蛋白(GFP等)报告基因,支持96/384孔板检测,结果通过化学发光仪或Celigo自动读取。然而与真病毒相比仍存在一定的差异性。
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指标 |
真病毒中和实验 |
Elisa中和实验 |
假病毒中和实验 |
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生物安全要求 |
BSL-3(高危病毒) |
BSL-1 |
BSL-2 |
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检测周期 |
5-7天 |
1-2小时 |
1-2天 |
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通量 |
低 |
中 |
高 |
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功能性评估 |
完整感染周期 |
仅抗原结合 |
仅入侵阶段 |
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灵敏度 |
高(金标准) |
中低 |
高(接近真病毒) |
中和抗体假病毒
假病毒(Pseudoviruses)是一种具有单轮感染能力的重组病毒颗粒,对于无包膜病毒通常利用其自身结构蛋白制备假病毒;对于包膜病毒,一般常用水疱性口炎病毒(VSV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)等包装体系制备假病毒。
枢密科技根据《基于假病毒的中和抗体检测法指导原则》,对中和抗体类假病毒进行了制备及分析方法的开发,并建立了完整的制备与检测体系,可提供假病毒中和抗体检测服务,助力疫苗及流行病学研究。

以慢病毒为例的假病毒的生产及中和抗体检测示意图(图片来源:Fantoni,Tobia et al, Journal of visualized experiments.,2023)
产品优势
1.真实性好:采用模拟外膜/壳结构假病毒,更真实反映临床样本中的病毒侵染机制。
2.安全性高:仅有单轮的感染力,无自主复制能力,具有高生物安全性,可在BSL-2实验室操作。
3.稳定性优:优化制备工艺,批次间质量高度稳定。
4.高质量假病毒制备:优质细胞株助力快速生产活性更好的假病毒产品。
5.结果直观:基于多种报告基因建立不同制备体系,通过化学发光仪或Celigo自动读取结果。
应用场景
1.疫苗效果评价:检测疫苗注射后血清中中和抗体的水平,评估疫苗的免疫效果。
2.药物筛选与评价:病毒抑制剂的筛选及药效评价。
3.机制探索:病毒感染机制研究
服务流程

中和抗体类假病毒产品
AAV中和抗体假病毒
我司可提供用于中和抗体和总抗体检测的AAV产品。

HPV中和抗体假病毒

★另外我们可提供原始株、Omicron株等SARS-COV-2假病毒载体(Pseudovirus VSV/LV-S)现货。
★可定制不同病毒株和报告系统,与真病毒结果相关性高(>90%)。
应用案例
(1) Luciferase法检测数据
新冠病毒假病毒血清中和检测(Luciferase)数据

(2)荧光法检测数据
不同血清稀释梯度下VSV假病毒侵染293T-ACE248h后,使用Celigo扫猫所得的病变细胞示意图(明场、荧光场、放大图)

枢密制备的假病毒,在侵染细胞后使用Celigo可以直观、精确地扫描获得细胞病变情况(即被感染的细胞数量),计算NT50,满足抗体或血清的中和检测筛选,结果准确可靠。
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文献和实验PCR PRIMER DESIGN AND REACTION OPTIMISATION
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删除突变的drs基因分析揭示,C末端区以及3个一致重复的N末端区都出现凋亡。Caspase-12、Caspase –9以及Caspase-3都继续被drs激活,Caspase--3,和Caspase-9的抑制剂都抑制drs引起的凋亡。在凋亡过程中没有看到因drs引起线粒体细胞色素C释放到细胞质去,这表明线粒体途径不是drs介导的凋亡,而且,研究人员发现,Drs蛋白能与定位在内质网的凋亡蛋白ASY/Nogo-B/RTN-x(S)结合,并且这些基因共同表达增加了凋亡的效果。这项研究结果提示,由ASY
腹痛、呕吐和虚脱。 有很强的腐蚀性。戴合适的手套和安全防目镜。 15. Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚) 能溶解脂质,以增加抗体对细胞膜的通透性。免疫细胞化学中Triton X-100常用浓度为1%和0.3%,其中1%的Triton X-100常用于漂洗组织标本,0.3%的Triton X-100则常用于稀释血清,配制BSA等。但通常是先配制成30%的Triton X-100储备液,临用时稀释至所需浓度。 在生命科学领域,该产品经常
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