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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司
- 运输方式:
常温/干冰
- 规格:
T25/瓶
人软骨细胞
Cat NO.: CP-H107
1.产品名称:人软骨细胞
2.组织来源:软骨组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
人软骨细胞分离自软骨组织;软骨组织由软骨细胞、基质及纤维构成。软骨组织再生能力强,这些增生的幼稚细胞形似纤维母细胞,以后逐渐变为软骨母细胞,并形成软骨基质,细胞被埋在软骨陷窝内而变为静止的软骨细胞。根据软骨组织内所含纤维成分的不同,可将软骨分为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨三种,其中以透明软骨的分布较广,结构也较典型。软骨细胞(chondrocyte)位于软骨陷窝内。幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层,单个分布,体积较小,呈椭圆形,长轴与软骨表面平行,越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形,染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
5.方法简介:
华韵实验室分离的人软骨细胞采用胶原酶 - 中性蛋白酶联合消化制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
6.质量检测:
华韵实验室分离的人软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
| 包被条件 | |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 产品货号 | CM-H107 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 梭形、多角形 |
| 传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
人软骨细胞体外培养周期有限;建议使用华韵配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
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文献和实验试剂和材料: 1. 分化培养基:DMEM/F12(1:1)、1%ITS(胰岛素、转铁蛋白、硒;V/V)、TGF-β1 1ng/ml、HEPES 10mmol/L; 2. 胰蛋白酶/EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53mmol/L)PBSA配制; 3. PBSA:无Ca2+,Mg2+的Dulbecco′s磷酸盐缓冲液; 4. 离心管,15ml; 5. 普通器皿,30ml,或圆锥底的离心管(50ml); 实验方法: 1. 从培养瓶中吸出生长培养基弃之; 2.
软骨细胞的原代培养龄新西兰乳兔(雌雄不限,共18只,分6次处理),溺死,置于75%酒精溶液中10分钟,拿入超净工作台,自眼外眦至耳屏前剪开皮肤暴露皮下组织,再次严格消毒,自外眦外将颧弓由根部剪断,暴露髁状突,去净髁状突表面软组织及软骨膜,以眼科剪剪取髁状突表面的透明软骨,以磷酸缓冲液(PBS含青霉素、链霉素各100U/L)冲洗2遍,将软骨剪切成1-3mm3 左右碎块,0.25%胰蛋白酶先消化30-35分钟,PBS浸洗2遍;后置于50ml玻璃培养瓶,加0.1%Ⅱ型胶原酶(DMEM配制),37消化
以兔软骨细胞为例: ①一般根据实验要求,选取不同年龄组的兔子,实际上兔子的年龄越小越好,毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力,耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨,剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜,放入盛有PBS液的培养皿中。 ②将分离得到的软骨组织剁碎成0.3-0.5mm的组织块,移入25cm2培养瓶,用含双抗的PBS液冲洗软骨3次。 ③加入软骨体积10-15倍的0.25%胰蛋白酶,37℃消化1-2小时后终止消化。 ④加入0.02%II型胶原
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