40411 真菌基因组DNA快速提取试剂盒（离心柱型）50次

FlashPure fungus GenomicDNA Kit

真菌基因组 DNA 提取试剂盒

（离心柱型）

目录号:40411

产品内容：

产品成份	40411-50（50 次）	40411-100（100 次）
Buffer LP1	20 ml	40 ml
Buffer LP2	10 ml	20 ml
Buffer LP3	15 ml	25 ml
Buffer WB2	13 ml	25 ml
Buffer EB	10 ml	15 ml
RNase A (10mg/ml)	250 ul	500 ul
DNA 吸附柱和收集管	50 套	100 套

自备试剂：

无水乙醇

保存条件：

室温（15 ~ 25℃）

产品简介:

适用于从多种真菌的不同部位的组织中快速提取高质量的基因组DNA，独特配方的缓冲液体系能有效去除植物组织中的多糖、多酚复合物和酶抑制剂，基因组DNA选择性吸附于硅基质膜上，再通过快速的漂洗、离心等步骤，去除其他杂质。提取过程不需要氯仿等有机试剂抽提，安全快捷。使用本Kit提取的植物基因组DNA，可直接进行PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。

产品特点:

1. 简便快速：30 min 内可获得高纯度的基因组 DNA。

2.  纯度高：OD260/280=1.7～1.9，可直接进行PCR、酶切和杂交等实验。

3. 安全无毒：安全、无毒，无需苯酚/氯仿抽提。

注意事项:

1.若Buffer LP1或Buffer LP3有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用。

2. 所有离心步骤均需要使用台式离心机，室温下离心。

3. 按要求在Buffer LP3和Buffer WB2中加入无水乙醇。

操作步骤:

第一次使用前，请先在 Buffer LP3 和 Buffer WB2 中加入指定量无水乙醇，加入体积详见瓶身的标签。

提示：所有离心步骤必须在室温（15~25℃）下进行。

1.取真菌新鲜组织 100mg 或干重组织 20mg，加入液氮充分碾磨，倒入

1.5ml 离心管中。

2. 加入 400μl Buffer LP1 和 4μl RNase A（10mg/ml），旋涡振荡 1min，室温放置 10min。

3. 加入 130 μl Buffer LP2，充分混匀，旋涡振荡 1 min。

4.12,000 rpm 离心 5 min，将上清移至新的离心管中。

（注意：只取上清液，不要吸取沉淀组织，大约 400μl 左右）

5.加入 1.5 倍体积的 Buffer LP3（例：400μl 上清液加 600μl Buffer LP3），立即充分振荡混匀 15 sec，此时可能会出现絮状沉淀。

6. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都转入到吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12,000 rpm 离心 30 sec，DNA 被吸附在膜上，弃收集管中废液。

（注意：吸附柱的最大容量是 750μl，超过此体积，可分 2 次进行）

7. 向吸附柱内加入 500μl 的 Buffer WB2，室温 12,000 rpm 离心 30 sec，弃收集管中废液。

（注意：如果吸附柱膜呈现绿色，可向吸附柱中加入 500μl 无水乙醇，12,000 rpm 离心 30 sec，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中）

8. 重复步骤 7 一次。

9. 室温 12,000 rpm 离心 2 min，甩干吸附膜上的残留液体。

（注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用）

10.   取出吸附柱，放入一个新的 1.5ml 离心管（自备）中，在吸附膜的中央加入 50~100μl Buffer EB，室温放置 2 min，12,000 rpm 离心 1 min，管底溶液即基因组 DNA。

（注意：为增加洗脱效率，可将洗脱液 Buffer EB 在 60℃预热。如果需要使用去离子水洗脱，可用 NaOH 调整其 pH 值在 7.0 ~ 8.5 之间，为了增加 DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置 2 min，再次离心收集）

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