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- 2025年07月12日
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99
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北京诺博莱德科技有限公司
RNAsafe 无液氮 RNA 样品保存液
目录号：91115
产品内容
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产品成份 |
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91115-100 |
91115-1000 |
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RNAsafe |
RT |
100 ml |
1000 ml |
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
产品简介
RNAsafe 是一种水相的，无毒的组织保存液体，可以迅速渗入新鲜组织细胞的胞浆中，在非冻状态下原位稳定和保护细胞内的RNA。适用于动物组织（心，肝，肾，肌肉，睾丸，脑，脾等）、培养细胞、RNA 病毒、果蝇、细菌、白细胞、全血、一些植物组织等。
特别适合野外和临床采集样本，无需携带液氮，浸入RNAsafe后，新鲜组织细胞中RNA可以完好地在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一个月, 在-20℃或-80℃下长期保存。RNA 病毒样品(如HCV 和HIV)可在37℃保存一个月。
产品特点
操作容易：将组织剪成适当大小，浸没在RNAsafe中即可使其RNA不被降解。
无需液氮：使样品的保存不需液氮干冰或-80℃冰箱 尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
方便运输：处理过的样品能在25℃保存一周，使样品邮寄和运输变得容易。
多次冻融: 经RNAsafe处理的样品可反复冻融多次，不影响提取的RNA 质量。
可比性强: 能减少重复实验中的误差，对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
兼容性广: 多种总RNA提取试剂都可以用来提取保存在RNAsafe内的样品。还可直接用于组织切片免疫学和流式细胞分析而不影响RNA提取的质量。
一、如何使用RNAsafe：
RNAsafe只用于新鲜组织，浸泡入RNAsafe前禁止冷冻组织。只需要迅速将新鲜组织剪成长，宽，高任意一边厚度<0.5厘米浸泡入RNAsafe即可（只要有一边厚度不超过0.5厘米，RNAsafe可以迅速渗透，其它两边的尺寸并不重要）。将新鲜组织浸泡在5倍体积的RNAsafe中，按要求存放在适当的温度。
1. 动物组织
RNAsafe并不破坏或者溶解组织结构，因此浸泡在RNAsafe中达到渗透平衡的组织可以从RNAsafe中取出，然后切成更小的块，然后放回到RNAsafe中下次继续使用。小器官如小鼠肝，肾，和脾不需要剪切，可以完整的存放在RNAsafe中。
2. 植物组织
很多植物组织直接浸泡入RNAsafe即可，有的植物有天然渗透屏障如腊质保护层，需要先破坏掉腊质层，便于RNAsafe渗透。
3. 组织培养细胞
细胞吹打下来后，离心收集细胞,弃上清，用冰浴的PBS缓冲液洗一次去除残留培养液。将细胞悬浮在少量PBS缓冲液中。加入五到十倍体积RNAsafe, 混均。
4. 血和血浆
和红细胞和血清分离的白细胞可以和组织培养细胞一样的保存。RNAsafe也可以保存抗凝全血，血清和血浆。对于全血加入3倍体积RNAsafe，混匀。
5. 酵母
离心收集3X108的细胞（>12，000g离心两分钟），立刻将细胞团重悬在0.5~1 ml 的RNAsafe中。酵母细胞可以保存在RNAsafe中25℃8小时或者4℃一个星期。如果要保存存更长时间，将酵母细胞在RNAsafe中放置一个小时后， 再次于>12,000g离心5分钟，将酵母细胞团放入液氮瞬时冷冻后放置于–80℃储存。
6. 细菌
细菌并不能在RNAsafe 中生长，但是RNAsafe并不破坏细菌，E. coli在4℃ 保存一个月仍旧可以提出完整的RNA。
二、RNAsafe中样本的存放：
1. 存放在–80℃
文档样品长期保存用。将RNAsafe中样本放置于4℃过夜，然后将样本捞出，尽量去除干净RNAsafe液体，然后放置于–80℃. 对于组织培养细胞，则不需要去除RNAsafe，直接冷冻于–80℃，并不会裂解细胞。样品使用时可以在室温融化，并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。
2. 存放在–20℃
将RNAsafe中样本放置于4℃过夜，然后转移到–20℃。在–20℃样品并不会被冰冻，但是可能会形成一些结晶，这并不会影响将来的RNA提取。样品使用时可以在室温融化，并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。
3. 存放在4℃
样本可以在4℃存放一个月。
4. 存放于25℃
存放于25℃样本的RNA在一周内保持完整，保存两周的样品RNA有轻微降解，勉强能用于northern analysis, 但是质量足够用于nuclease protection assay or RT-PCR analysis。
5. 存放于37℃
存放于37℃样本的RNA在24小时内保持完整，3天的时候有部分降解。
三、RNAsafe 保存样本的 RNA 提取：
将样本从RNAsafe中取出，RNAsafe可以直接倒入水池，用自来水冲洗即可，不需特殊处理。
1. 组织
需要用干净镊子将样本从RNAsafe中捞出，用吸水纸稍稍吸去残留的RNAsafe后，可以和新鲜组织一样按照液氮研磨，然后匀浆处理的标准程序进行提取RNA。
2. 细胞
对于储存在RNAsafe中的细胞有两种选择。一是去除RNAsafe后提取RNA, 另一个是直接从细胞和RNAsafe的混合物提取。
a. 去除 RNAsafe 后提取 RNA
存放于RNAsafe中的细胞变得不那么脆弱，可以承受较高的离心速度而不被裂解。我们有在5000g离心成功收集细胞的经验，由于每种细胞的强度不一样， 可以先用不重要的细胞做个预试验，以保证在使用的速度下离心不会破坏细胞。另一个选择是在离心前加等体积的
PBS稀释RNAsafe和细胞的混合物，以减少溶液的密度，使细胞溶液可以沉淀下来。
b. 不去除 RNAsafe，直接提取 RNA
也可以直接加10倍体积的一步法提取试剂（如RNAzol，Trizol reagent）到细胞和RNAsafe的混合物，然后按照正常步骤操作。
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文献和实验10分钟。将会看到血液分为2层，上层是淡黄色的血浆，约占60%。2、用巴士滴管或吸管将上层血浆吸出，还剩约1ml血细胞层，在血细胞层中加入1：1体积，即约1ml的灭菌生理盐水，混匀，见图2。 图2 在血细胞中加入生理盐水充分混匀 3、以下是把12ml生理盐水与血细胞混合物（相当于12ml全血）合并成一管后分离白细胞过程。将24 mL淋巴细胞分离液（是全血体积的2倍）预先加入灭菌的50 mL 离心管中。将与生理盐水混合的血细胞缓慢加入淋巴细胞分离液液面上，注意尽量不要让血细胞层掺入到淋巴
】1. 消化缓冲液：100 mM NaCl，10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存；2. 将 200 mg～1 g 的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮，然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
/定量研究基因表达分析的重要前提。为了达到这个目的，往往需要将液氮或者干冰带到采样现场，采样后立即抽提RNA或者运回实验室保存。对于实验者来说非常不方便。著名的QIAGEN公司最近新推出一种RNA抽提试剂：RNeasy Protect Kit，提供一整套RNA保护和分离试剂，从样品的制备到RNA的抽提，只需一个试剂盒即可解决所有问题。保证样品的表达信息不受破坏，确保得到可信的基因表达分析结果。试剂盒里提供一种RNAlater RNA Stabilization Reagent，只要在采样后立即将新鲜
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