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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
59
- 英文名：
RNA 长效液
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1.5mL
(1) RNA 长效液1.5mL费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
储存事项:
A. RNA 长效液1.5mL费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. RNA 长效液1.5mL费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
Rosetta 感受态细胞10×100μL XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10
TB1 感受态细胞10×100μL X-Gal 溶液，20mg/mL10mL
Stbl3 感受态细胞0.1 mL×10 X-Gal 干粉0.5g
T1 感受态细胞10×100μL X 光片 (8×10 英寸 )1盒
XL10-Gold 感受态细胞0.1 mL×10 X 光片 (5×7 英寸 )1盒
大片段 DNA 分子量标准50μg 凝固血液 DNAout30 次
脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)50 次 凝固血液 DNAout100 次
脉冲电泳 Marker(Lambda LadderPFG)50 次 镍柱介质2mL
脉冲电泳 Marker( 低范围 PFG)50 次 镍柱介质10mL
超螺旋 DNA 分子量标准100uL 尿道上皮细胞生长因子5mL
前列腺上皮细胞生长因子5mL dNTP 溶液，100mM 0.5mL
前脂肪细胞生长因子5mL dNTP 溶液 ,10mM5mL
乳腺上皮细胞生长因子5mL dNTP 溶液 ,10mM0.5mL
上皮细胞生长因子5mL dNTP 溶液 ( 标记专用 )0.5mL
上皮细胞生长因子 -25mL dNTP 和引物清除剂100 次
叠氮葡萄糖肉汤 英文名称； 规格； 250g
MC培养基（不含琼脂） 英文名称； 规格； 250g
肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂） 英文名称； Bile Aesculin Azide Agar 规格； 250g
胆汁肉汤 英文名称； Bile Broth 规格； 100g
40%胆汁肉汤 英文名称； 40%Bile Broth 规格； 100g
琼脂培养基F Agar medium F 250g
肉汤培养基G Broth medium G(MacConkey broth) 250g
琼脂培养基H Agar medium H(MacConkey agar) 250g
肉汤培养基I Broth medium 250g
琼脂培养基J Agar medium J (Deoxycholate citrate agar) 250g
RNA 长效液1.5mL费用含225ml磷酸盐缓冲液均质袋 用于菌落总数，大肠菌群，金葡菌，大肠杆菌样品制备用于菌落总数，大肠菌群，金葡菌，大肠杆菌样品制备
含90ml磷酸盐缓冲液均质袋 用于菌落总数，大肠菌群，金葡菌，大肠杆菌样品制备用于菌落总数，大肠菌群，金葡菌，大肠杆菌样品制备
含225ml 缓冲蛋白胨水（BPW）均质袋 用于沙门氏菌、阪崎杆菌制样和前增菌培养用于沙门氏菌、阪崎杆菌制样和前增菌培养
含900ml缓冲蛋白胨水（BPW）均质袋 用于阪崎杆菌的定量用于阪崎杆菌的定量
服务流程：
1）RNA 长效液1.5mL费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
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文献和实验相关专题 miRNA RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”，但越来越多的证据清楚的表明，RNA在生命的进程中扮演的角色远比RNA我们早前设想的更为重要。 RNA干扰（RNA interference）的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识，更因为可以简化替代基因敲除而成为研究基因功能的有力工具，因此格外引人注意，在2002年度Science评选的10大科学成就中RNAi名列榜首。 随着对小分子RNA研究的不断深入，研究人员开始认识到：小分子RNA的世界一点都不小
钠，5mmol/L DETA(pH8.0)4）甲醛, 甲酰胺3 仪器: 电泳装置，紫外透射观测仪二、实验程序1 甲醛变性的琼脂糖(Agarose) 凝胶的配制在250mL的锥形瓶中准确称量2g Agarose （Sigama），再加20mL 10×TAE Buffer，144mLDEPC处理过的双蒸水，微波炉中化胶，待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛，放置一段时间以减少甲醛蒸汽。2 RNA的甲醛变性电泳1） 样品制备，RNA总量10μg，5×甲醛凝胶电泳缓冲液
更换此电泳缓冲液。6、1.2%的甲醛变性胶：称0.4克琼脂糖，加入3.34 ml 10×FA gel buffer，加入30 ml DEPC水，微波炉融化，肉眼观察无颗粒状悬浮物。冷却至约50-60℃，再加入600 l甲醛，倒入7.5×5.0 cm的凝胶模具中。插入合适长度和宽度的梳子，室温放置约30min后即可使用。三、实验方法一般取0.3 g的总RNA，加入1/5体积的5×加样缓冲液，65℃加热5 min，冰上骤冷，以消除RNA的二级结构。建议上样前在RNA样品中加入0.5-1.0 ul的溴化
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