91452 高效植物总RNA提取试剂盒(带gDNA清除柱)(

高效植物总 RNA 提取试剂盒

FlashPure Plus Plant Total RNA Mini Kit

 

目录号：91452

产品内容

产品成份	91452-50（50 次）
裂解液 PAL Plus	30 ml
去蛋白液 RW1	40 ml
漂洗液 RW	10 ml（需加入指定量无水乙醇）
RNase-Free H2O	10 ml
DNA 清除和 RNA 吸附通用柱	100 套
RNase-Free 1.5ml 离心管	50 支

自备试剂

无水乙醇

保存条件

室温（15 ~ 25℃）

产品简介

适用于快速提取各种植物根、茎、叶、花的总RNA，gDNA过滤器能高效滤除gDNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE、芯片等。

本试剂盒是同类产品中适应性最广泛，不但可以提取小麦、玉米、水稻、大豆、番茄、烟草、拟南芥等简单植物，也可以提取茶树叶片、棉花叶片、葡萄叶片、杨树叶片、番薯叶片、花生叶片、香蕉叶片、荔枝叶片、白松叶片等多糖多酚含量一般的植物。

如果遇到果实、种子、中草药，例如：多糖多酚巨高的作物种子（小麦/玉米/大豆/水稻）、葡萄果实、蓝莓果实、百合鳞茎、土豆块茎；或者次级代谢产物巨丰富的葛根、虎杖、雪莲等药用植物，请选择91513-果实种子总RNA提取试剂盒。

产品特点

1. 无毒：免氯仿、免β-巯基乙醇！

2. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高效：提取全过程仅需 20min！

重要提示：

a. 第一次使用前请先在漂洗液RW中加入指定量无水乙醇，详见瓶身的标签。

b. 所有离心步骤均需要在室温（15 ~25℃）下进行。

操作步骤：

1. 材料处理：

a．在液氮中研磨植物组织成细粉，取 50 ~ 100 mg 细粉加入 600 μl裂解液 PAL Plus，立即剧烈涡旋震荡 30 sec，充分混匀。

b．将裂解物 13,000 rpm 离心 5 ~ 10 min，沉淀不能裂解的碎片。

2. 小心吸取 500 μl 上清转入一个 DNA 清除和 RNA 吸附通用柱（以下简称通用柱），13,000 rpm 离心 1 min，DNA 被吸附在膜上，丢弃带吸附膜的内柱，保留滤液（RNA 在滤液中）。

3. 向滤液中加入 0.5 倍体积 (一般 250 μl ) 的无水乙醇，吹打混匀。

4. 转移滤液混合物至一个新的通用柱中（通用柱已放入收集管中），13,000 rpm 离心 1 min，倒弃滤液。此时，RNA 被吸附在膜上。

5. 加入700μl去蛋白液RW1，室温放置 1min，13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。  

6. 加入 500 μl 漂洗液 RW，13,000 rpm 离心 30 sec，倒弃滤液。

7. 重复步骤 6。

8. 将通用柱放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 min，除去膜上残留的乙醇。

9. 取出通用柱的内柱，放入 1.5ml RNase-free 离心管中，向吸附膜的中央悬空滴加 30-50μl RNase-free H2O，室温放置 1 min，13,000 rpm 离心 1 min。

10. 提取的总 RNA，可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以免降解。

相关产品： 

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

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71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (适用于所有 qPCR 仪)

附录：

一、免液氮直接研磨（自动研磨仪）—— 适用于新鲜样本

a. 在 2.0 ml 液氮研磨管中放入2粒4 mm 的钢珠，加入600 μl 裂解液 PAL Plus，放入≤60 mg 样本，设置65个频率，震荡 2 min。

b. 将裂解物 13,000 rpm 离心 5 – 10 min，沉淀不能裂解的碎片。

二、液氮研磨（自动研磨仪）—— 适用于各种样本，尤其是富含糖酚含或

易降解的样本

a. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3 mm钢珠3粒，放进≤50 mg 样本，投入液氮中预冷。把研磨模块也丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。

b. 把预冷好的离心管插入研磨模块中，放进研磨仪，设置55个频率，震荡 30 - 60 sec。（以北京赫得京 N9548 为例）

c. 研磨完成后，马上加 500μl 裂解液 PRL 和 50μl 糖分去除剂 PAD，剧烈涡旋 30 sec。

d. 将裂解物 13,000 rpm 离心 5 - 10 min，沉淀不能裂解的碎片。