- ￥171
- 丽山生物
- E0067-100
- 济南
- 2026年01月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
LSfast™ SmaI
- 保质期：
2年
- 供应商：
山东丽山生物科技有限公司
- 保存条件：
﹣20℃
- 规格：
100 rxns
产品介绍
5'...C C C ↓ G G G...3'
3'...G G G ↑ C C C...5'
LSfast™ SmaI 快速内切酶可识别CCCGGG位点，并使用通用 LSfast™ 缓冲液于 25°C 下在 5–15 分钟内的切割效果最佳，37℃反应时酶活性会略降低，需适当延长温育时间。
异裂酶：Cfr9I, TspMI, XmaI。
产品组成
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组分 |
规格 |
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LSfast™ SmaI |
100 μl |
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10× LSfast™ Buffer |
1 ml |
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10× LSfast™ Color Buffer |
1 ml |
失活条件
80℃温育20 min。
甲基化敏感性
对于被 CpG 甲基化的 DNA，剪切可能受阻。
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文献和实验性，在胡萝卜II型转化酶基因启动子的克隆方面取得了新的进展。首先将胡萝卜基因组DNA 分别用PvuI、SmaI、DraI、EcoRV酶切，并设计了1个衔接头长链序列和1个衔接头短链序列，并在衔接头短链的3'末端带有1个氨基的衔接头，能够阻止聚合酶催化的衔接头短链的延伸，同时衔接头的长链和短链之间是反向重复序列。将酶切片段与此衔接头连接，取连接产物做模板，以衔接头引物和基因特异引物做PCR ，在首轮PCR 中只有限定的远端基因特异引物有结合位点，当基因特异引物延伸产生的DNA 链通过衔接头时，才能产生衔
了一种新技术COMPARE-MS，该法将MBD柱层析法与MS-RE联用，互补了各自单用的弊处，能够快速、敏感的检测DNA甲基化情况，可用于临床标本检测，作为早期诊断和肿瘤分级的依据[56]。其过程是：用非待测区的内切酶和甲基化敏感的限制性内切酶同时消化DNA片段，随后通过MBD柱捕获，保留了含有甲基化区的片段，最后通过实时PCR扩增定量分析（见图9）。 图9：联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD（COMPARE-MS）示意图。用甲基化以外的位点的内切酶（A酶）与甲基化敏感的内切酶（B酶）联用
本领。 经典分子克隆技术vs无缝组装克隆技术 技术总是随着时间向前发展的，由难到易，化繁为简，将不能变为可能。分子克隆技术的发展完美体现了这一点。 以构建表达载体为例，经典分子克隆中，要将目标片段插入载体，全靠内切酶的拆分和连接酶的拼接。关键是选择合适的酶切位点，使得酶切“拆”得的目标片段末端和相应载体末端正好能互补“拼”在一起，连接酶才能连起来。选择酶时首先不能破坏目标基因完整性（包含从起始密码到终止密码）及载体完整性；其次，尽量避免选两个酶切生成粘端一样的（粘端互补）——两边粘端一样的载体“偏爱
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