- ￥171
- 丽山生物
- E0040-200
- 济南
- 2026年01月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
LSfast™ KpnI
- 保质期：
2年
- 供应商：
山东丽山生物科技有限公司
- 保存条件：
﹣20℃
- 规格：
200 rxns
产品介绍
5'...G G T A C ↓ C...3'
3'...C ↑ C A T G G...5'
LSfast™ KpnI 快速内切酶可识别GGTACC位点，并使用通用 LSfast™ 缓冲液于 37°C 下在 5–15 分钟内的切割效果最佳。
异裂酶：Asp718I, Acc65I。
产品组成
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组分 |
规格 |
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LSfast™ KpnI |
200 μl |
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10× LSfast™ Buffer |
2×1 ml |
|
10× LSfast™ Color Buffer |
2×1 ml |
失活条件
不可热失活，请使用酚氯仿抽提或柱纯化。
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文献和实验通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增，得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小，然后通过胶回收，获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基，回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒：将原始的质粒载体，比如 pcDNA3.1 质粒，选择合适的酶切位点，比如 NheI/KpnI 进行酶切，获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul，试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时，或适当延长时间，保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增，得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小，然后通过胶回收，获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基，回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒：将原始的质粒载体，比如 pcDNA3.1 质粒，选择合适的酶切位点，比如 NheI/KpnI 进行酶切，获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul，试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时，或适当延长时间，保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)（BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等） 在分子克隆实验中，限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体，要根据载体选择合适的内切酶（当然，使用T载就不必考虑了）。先将引物设计好，然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
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