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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 英文名:
LSfast™ FokI
- 保质期:
2年
- 供应商:
山东丽山生物科技有限公司
- 保存条件:
﹣20℃
- 规格:
100 rxns
产品介绍
3'...C C T A C (N)₁₃↑...5'
LSfast™ FokI 快速内切酶可识别GGATG(9/13)位点,并使用通用 LSfast™ 缓冲液于 37°C 下在 5–15 分钟内的切割效果最佳。
同裂酶:BtsCI, BstF5I, BseGI。
产品组成
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组分 |
规格 |
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LSfast™ FokI |
100 μl |
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10× LSfast™ Buffer |
1 ml |
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10× LSfast™ Color Buffer |
1 ml |
失活条件
80℃温育20 min。
甲基化敏感性
对于被 Dcm 甲基化的 DNA,剪切可能受阻。
对于被 CpG 甲基化的 DNA,剪切可能受阻。
对于被 EcoBI 甲基化的 DNA,剪切可能受阻。
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文献和实验生物界一系列惊人的发现改变了这个学科,也让生物学家们以前所未有的方式对细胞上下其手。当然,这要感谢原核生物们进化出的这一套稀奇古怪的免疫系统。一系列的研究揭示出了细菌这一免疫系统的运作方式,并很快挖出名为 Cas9 蛋白的幕后黑手,一个受 RNA 引导的 DNA 内切酶。疯狂的科学家们很快发现了 Cas9 蛋白编辑基因组的潜在能力,并做出了一系列的探索。 两年前,一些研究表明通过 Cas9 蛋白和向导 RNA 的在真核细胞中共表达,可以实现位点特异性的 DNA 编辑,到如今上千
氨基酸残基决定锌指的DNA结合特异性,骨架结构保守。对决定DNA结合特异性的氨基酸引入序列的改变可以获得新的DNA结合特异性。 现已公布的从自然界筛选的和人工突变的具有高特异性的锌指蛋白可以识别所有的GNN和ANN以及部分CNN和TNN三联体。多个锌指蛋白可以串联起来形成一个锌指蛋白组识别一段特异的碱基序列,具有很强的特异性和可塑性,很适合用于设计ZFNs。与锌指蛋白组相连的非特异性核酸内切酶来自FokI的C端的96个氨基酸残基组成的DNA剪切域(Kim et al., 1996
长度也有所不同,对于哺乳类动物(包括人)一般选择15-30bp的DNA序列作为识别序列。 图1 RVD识别一个碱基 2. TALEN质粒对的构建 将识别特异靶DNA序列的TALE与核酸内切酶FokI偶联,可构建成TALEN质粒。FokI需形成二聚体方能发挥活性。因此在目标DNA中选择两处(间隔13-22个碱基,保证FokI能形成二聚体)序列(Cellectis Bioresearch一般选择17个碱基),分别克隆形成表达载体,得到TALEN质粒
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