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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 英文名:
LSfast™ SalI
- 保质期:
2年
- 供应商:
山东丽山生物科技有限公司
- 保存条件:
﹣20℃
- 规格:
200 rxns
产品介绍
5'...G ↓ T C G A C...3'
3'...C A G C T ↑ G...5'
LSfast™ SalI 快速内切酶可识别GTCGAC位点,并使用通用 LSfast™ 缓冲液于 37°C 下在 5–15 分钟内的切割效果最佳。
产品组成
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组分 |
规格 |
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LSfast™ SalI |
200 μl |
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10× LSfast™ Buffer |
2×1 ml |
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10× LSfast™ Color Buffer |
2×1 ml |
失活条件
80℃温育20 min。
甲基化敏感性
对于被 CpG 甲基化的 DNA,剪切可能受阻。
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文献和实验常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)(BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等) 在分子克隆实验中,限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体,要根据载体选择合适的内切酶(当然,使用T载就不必考虑了)。先将引物设计好,然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
了一种新技术COMPARE-MS,该法将MBD柱层析法与MS-RE联用,互补了各自单用的弊处,能够快速、敏感的检测DNA甲基化情况,可用于临床标本检测,作为早期诊断和肿瘤分级的依据[56]。其过程是:用非待测区的内切酶和甲基化敏感的限制性内切酶同时消化DNA片段,随后通过MBD柱捕获,保留了含有甲基化区的片段,最后通过实时PCR扩增定量分析(见图9)。 图9:联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD(COMPARE-MS)示意图。用甲基化以外的位点的内切酶(A酶)与甲基化敏感的内切酶(B酶)联用
位点,可以将扩增产物进行序列分析。从中选择出独特的结构,体外合成某一白血病细胞克隆所特异的寡核苷酸探针,可在个体的水平上检测残留的白血病细胞,并可进行定量分析,有助于更精确的探讨临床治疗问题。 【操作方法】 (1) 引物设计:引物1来源于FR3中的一段最保守的序列,在所有的VH家族都有同源性。该引物5’端经修饰而产生一个限制性内切酶SaLI的位点,引物序列如下:5’―CTGTCGACACGGCCGTGTATTACTG―3’,引物2的序列是与JH片段3’端相互补的反义
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