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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
蒂科生物
- 库存:
现货充足
- 英文名:
HT29-MTX-E12
- 生长状态:
贴壁生长
- 运输方式:
T25/冻存管
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 组织来源:
结肠
- 规格:
T25
| 甲氨蝶呤诱导HT29细胞分化为成熟杯状细胞使用MEM培养基(推荐HAKATA货号A19512);10%胎牛血清(推荐HAKATA货号:HN-FBS-500);1%双抗(推荐HAKATA货号:H8611) |
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注意事项↓ 悬浮细胞漂浮的处理方法 注意:瓶中运输培养基不能继续使用,请换用按照说明书培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。培养悬浮细胞建议用未经TC处理的培养瓶。 1.收到货发现有任何异常现象、污染、漏液、细胞漂浮等,请拍照记录,并及时联系我们销售人员或技术支持; 2.用 75% 酒精擦拭瓶身,封口膜可以不用撕去,将 T25 瓶置于培养箱中静置 2~4h 后进行操作;悬浮细胞请将培养瓶竖立在培养箱中静置。在此期间,请查看说明书以确定细胞属性; 3. 静置4h后,请将瓶内所有细胞收集至6个15ml的离心管110g(1000rpm)离心3min,将所有离心后的细胞沉淀收集到一个T25培养瓶内,平放10分钟,镜下观察细胞密度,拍照记录后放入培养箱中继续培养,第二天密度达到80%即可传代; 4.悬浮细胞传代方法:观察细胞无碎片无死细胞的情况下,建议直接加入新鲜完培直接分瓶即可。
贴壁细胞漂浮的处理方法 注意:部分细胞由于贴壁松散,会出现运输后漂浮,冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮,属于不可避免 因素,正确处理后均可以正常生长。 1 .将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞(1200rpm约250g-300g离心力,离心 3-5min)去除旧培养基; 2. 用PBS重悬细胞,将所有细胞收集到一个离心管中,再次离心(1200rpm约250g-300g离心 力,离心3-5min)去除PBS; 3 .加入1ml左右胰酶EDTA溶液,0.25%重悬细胞,混匀即可,建议震动离心管混匀,避免吹打细 胞,放入培养箱消化细胞,根据细胞特性决定消化时间(TM3、TM4、293 系列约1~2分钟); 注意:部分细胞不能使用胰酶消化,请注意查看细胞说明书;单颗漂浮的细胞不需要胰酶处理。 4. 消化好后,用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散,迅速加入3-5ml含10%以上血清的培 养基混匀终止消化,离心(1200rpm 3min)去除胰酶; 5.加入5ml左右的细胞完全培养基混匀,按比例接入无菌培养瓶中; 6. 显微镜下观察细胞是否成均匀分散的单颗细胞,若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化,使 之贴壁后待细胞生长稳定后再次传代消散细胞。
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