肇州链霉菌

链霉菌（放线菌）超声破碎条件

    放线菌属于原核生物系统进化树上的（G＋C）摩尔百分含量（mol％）高的革兰氏阳性菌（Eubacteria）分枝类群，它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性，但在其不同类群中，细胞壁的化学组分变化很大。在做大肠杆菌超声时，采用的是400W，破碎5s停5s的方法，效果不错，但是用在链霉菌上，由于细胞壁组成差异一般没什么效果。     链霉菌（放线菌）超声破碎前处理

链霉菌实验操作7

遗传作图相关技术链霉菌孢子悬液的制备从已经长好的固体培养基上用棉签刮取孢子，使孢子悬浮于离心管中的无菌水中；将离心管放在振荡器上尽可能地激烈振荡1分钟左右；用装有脱脂棉的试管过滤悬液以除去菌丝片段和固体培养基碎片；3000转/分离心5-10分钟以使孢子沉淀，停止离心后马上倒掉上清液；将离心管在振荡器上振荡几秒钟使孢子沉淀物分散于残存的一点无菌水中；加入无菌的20%甘油于-20℃保存。链霉菌中NF的证明链霉菌中的普通致育型因子（NF）能够产生次甲基霉素，能将旁边不携带NF的链霉菌杀死。将待证明

链霉菌质粒DNA的小量提取

1、将适量的菌体悬浮于500μl溶菌酶溶液（2%）中，37℃温育1hr 左右至完全溶菌，2、加入500μl碱性SDS溶液（0.3mol/L NaOH, 2%SDS），立即振荡混合完全，3、打开管盖，在70℃放置15min（对大于20kb的质粒则最好放在55℃， 30min），然后于水浴中冷却至室温，4、加入100μl酸性苯酚/氯仿溶液，用混合器振荡至液体彻底混合均匀，12000rpm离心5min,移取上清液，弃去白色中间层。5、用中性苯酚/氯仿重复抽提直至看不见（或非常少）中间