总三碘甲状腺原氨酸（TT3）测定试剂盒（化学发光法）

【求助】那位大侠用过CAMP测定试剂盒？急需帮忙

：分别是竞争性蛋白质结合分析法[3]、放射性免疫分析法[4]和薄层色谱法[5]。在80年代，放射性免疫分析法得到了广泛的应用和改进，由于这种方法采用放射性核素标记，应用范围受到一定限制，为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性，进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒，这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应，所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗，毫无疑问，兔多抗在约四十年的cAMP，cGMP定量

蛋白免疫印迹技术

对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂），匀浆后抽提总蛋白（或核蛋白）。实验对象为细胞样品，每份样品取1×106~1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂）抽提总蛋白（或核蛋白）。2. 蛋白质定量：按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳（SDS-PAGE）：将准备好的样品液和预染

Western Blot转膜步骤

结合。 封闭过的膜加入一抗室温孵育1.5小时，抗原 抗体结合。 加入HRP标记的二抗体以结合一抗，室温孵育膜1小时。加入HRP标记的GAPDH抗 体可同时检测GAPDH含量。 6. western blot结果检测：化学发光法检测，膜与化学发光底物孵育，经X胶片曝光显 影。图片扫描保存为电脑文件，并用GIS1000分析软件将图片上每个特异条带灰度值的数字化。 7. western blot数据分析：目的蛋白的灰度值除以内参GAPDH/Actin的灰