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武汉华尔纳生物科技有限公司
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T
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细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务 (养不活无理由全额退款)

类别 | 原代细胞 |
生长特性 | 悬浮生长 |
培养体系 | 专用培养基 |
传代方法 | 不建议传代 |
细胞形态 | 圆形 |







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文献和实验人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血,用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释,上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中,先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液(1.077 g/mL),再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液,血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注:Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温,温度过高会导致分离不明显,温度过低会导致密度过大,同样分离效果不好, 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
。如果直接倒掉,离心管内会有残留裂解液,后续加入100 μL PBS重悬细胞时,可能不能完全稀释裂解液,导致红细胞裂解过度。 6. 细胞沉淀重悬,可用枪轻轻吹打,或者用转速小的涡旋仪涡旋。 7. 人血样本建议染CD45,有利于后续数据分析时圈门。 8. 处理人血样本时,推荐设置只染CD45的单染管低速上机用来设置阈值,观察细胞量,圈淋巴细胞群。 9. 人外周血中主要含T淋巴细胞,B淋巴细胞的量较少。如果使用病人的血液样本,B淋巴细胞的量可能更少,因此B淋巴细胞的检测不推荐使用过夜的样本,过夜样本易导致
度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息: MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit(BioLegend, Cat#480009),阴性分选试剂盒2.检测仪器型号:BD LSRⅡ3.样本:正常人外周血4.分选前后检测相关产品:PE-CD4(Biolegend, Cat# 317410)5.实验过程(1)采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。(达优,Cat#DKW-KLSH-0100






