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小鼠骨髓间充质干细胞永生化

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  • 小鼠骨髓间充质干细胞永生化
  • 2025年12月22日
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      上海蒂科

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      现货充足

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 运输方式

      T25/冻存管

    • 细胞形态

      长梭形细胞样,不规则细胞样

    • 组织来源

      正常骨髓血组织

    • 规格

      T25

    骨髓间充质干细胞是骨髓基质干细胞,对骨髓中的造血干细胞(HSC)不仅有机械支持作用,还能分泌多种生长因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)来支持造血。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潜能,能促进间充质组织的再生,如:骨、软骨、肌肉、韧带、肌腱、脂肪及基质等组织。在骨髓中,BMSCs占骨髓有核细胞总数的0.001%~0.1%,含量极低。而同时,由于组织工程需要大量的种子细胞,从啮齿类动物骨髓分离BMSCs的技术上的难度限制了许多实验的开展。体外分离培养纯度高、活力强、生物特性均一的BMSCs对组织工程及细胞的体内、体外实验显得至关重要。

    小鼠骨髓间充质干细胞永生化使用基础培养基500ml;生长添加剂5ml;胎牛血清50ml(推荐HAKATA货号HN-FBS-500);双抗5ml(推荐HAKATA货号:H8611);

    注意事项↓
    悬浮细胞漂浮的处理方法
    注意:瓶中运输培养基不能继续使用,请换用按照说明书培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。培养悬浮细胞建议用未经TC处理的培养瓶。
    1.收到货发现有任何异常现象、污染、漏液、细胞漂浮等,请拍照记录,并及时联系我们销售人员或技术支持;
    2.用 75% 酒精擦拭瓶身,封口膜可以不用撕去,将 T25 瓶置于培养箱中静置 2~4h 后进行操作;悬浮细胞请将培养瓶竖立在培养箱中静置。在此期间,请查看说明书以确定细胞属性;
    3. 静置4h后,请将瓶内所有细胞收集至6个15ml的离心管110g(1000rpm)离心3min,将所有离心后的细胞沉淀收集到一个T25培养瓶内,平放10分钟,镜下观察细胞密度,拍照记录后放入培养箱中继续培养,第二天密度达到80%即可传代;
    4.悬浮细胞传代方法:观察细胞无碎片无死细胞的情况下,建议直接加入新鲜完培直接分瓶即可。
     
     
    贴壁细胞漂浮的处理方法
    注意:部分细胞由于贴壁松散,会出现运输后漂浮,冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮,属于不可避免
    因素,正确处理后均可以正常生长。
    1 .将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞(1200rpm约250g-300g离心力,离心
    3-5min)去除旧培养基;
    2. 用PBS重悬细胞,将所有细胞收集到一个离心管中,再次离心(1200rpm约250g-300g离心
    力,离心3-5min)去除PBS;
    3 .加入1ml左右胰酶EDTA溶液,0.25%重悬细胞,混匀即可,建议震动离心管混匀,避免吹打细
    胞,放入培养箱消化细胞,根据细胞特性决定消化时间(TM3、TM4、293 系列约1~2分钟);
    注意:部分细胞不能使用胰酶消化,请注意查看细胞说明书;单颗漂浮的细胞不需要胰酶处理。
    4. 消化好后,用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散,迅速加入3-5ml含10%以上血清的培
    养基混匀终止消化,离心(1200rpm 3min)去除胰酶;
    5.加入5ml左右的细胞完全培养基混匀,按比例接入无菌培养瓶中;
    6. 显微镜下观察细胞是否成均匀分散的单颗细胞,若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化,使
    之贴壁后待细胞生长稳定后再次传代消散细胞。
     
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