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10 mM * 1 mL
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文献和实验， Fast程序，以cDNA为模板进行。C. 目的基因的设置：有几个目的基因和目的基因的名称。D. 样品的设置：包括哪个是实验组，哪个是对照组。以及负对照的设置和生物重复的设置。E. 对照组和内参基因的设置：这个是为后面的定量做准备F. 反应程序的设置：PCR反应程序的设置要根据不同公司的MasterMix。比如BioTeke的95℃ 2分钟就可以激活DNA聚合酶（ABI的需要10 分钟）。循环反应是95℃15秒，60℃15秒的40个循环。溶解曲线程序采用仪器默认设置就可以。或者是仪器说明书上建议的程序
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
TaqMan@探针和分子信标，利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加；一类为非探针类，其中包括如 SYBR@Green I 或者特殊设计的引物(如 LUX @Primers ) 通过荧光染料来指示产物的增加。 3.1 Taqman@探针法 Taqman@探针是最早用于定量的方法。就在 PCR 扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸：5’端标记一个报告荧光基团，3’端标记一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，也就是 FRET 反应
【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料
EvaGreen qPCR 荧光染料一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料 EvaGreen®是一种用于实时定量 PCR（qPCR）的 DNA 结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于 SYBR Green I。除了有相似的光谱特性，EvaGreen 有三个主要特点使它区别于 SYBR Green I。首先，EvaGreen 对 PCR 的抑制性远小于 SYBR Green I。因此，使用EvaGreen 进行的 qPCR 实验可以使用快速 PCR 步骤
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